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如何正确选择ELISA试剂盒
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ELISA试剂盒在实验室已经相当普及,绝大多数ELISA试剂盒都是用于检测未知样本中抗原的浓度。用试剂盒当然比自己慢慢摸条件快得多,ELISA试剂盒不仅可以让实验更便利,往往还更加精确。现在市面上的ELISA试剂盒既有国产也有进口,数量繁多令人目不暇接,怎样才能选出适合自己的产品呢?首先当然得根据我们所要检测的分子进行检测,除此以外也还有一些需要加以考量的因素。 第一步、明确检测何种蛋白。 第二步、明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性好。 第三步、寻找检测这些物种蛋白的试剂盒。 第四步、咨询商家ELISA是试剂盒使用的抗体类型:多抗还是单抗? 单抗是针对什么抗原决定簇的? 第五步、 做出自己的判断该买哪个试剂盒。 从Elisa试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度、简便性、安全性及经济性全面评价: 灵敏度: ① 为试剂检出被检物质的低量的能力; ② 为试剂对大量样品中阳性检出的能力; 特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标; 精密度:ELISA试剂一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围; 准确度:通过添加回收实验进行评价; 简便性:指在不影响试剂的前三项指标的前题下,实验和测定步骤越少越好,在定性实验中结果判断简单明了,定量试验结果计算也应简单; 安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性; 经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理; 试剂评价:需要有准确的确证方法和确证的样品进行检测。 根据实验类型、抗体类型、交叉反应、检测方式来选择Elisa试剂盒。文章就写到这里,欢迎大家交流学习,谢谢! |
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