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kafu

金虫 (小有名气)

[交流] 为何DNA纯化后反而出现杂质

最近做实验时发现,PCR后的DNA跑胶只有2.2kb一条带,可做了纯化后(elution)再次跑胶,除了2.2kbp条带外,在800-900bp处也出现了一条带。虽然比2.2kbp弱,可是还是很清楚。而且重复出现。请问这是为什么?究竟什么会导致这个现象?
非常感谢。
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j2

木虫 (正式写手)


kafu(金币+1,VIP+0): 10-21 13:15
除了试剂盒污染,还有种可能,是你pcr本来就有2条带,而那一段浓度低,开始没看出来,纯化浓缩后,浓度相对高了,看出来了~
修炼ing,当虫仙……
7楼2009-10-18 10:11:39
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your2007

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
350784478(金币+1,VIP+0):感谢提供 10-14 19:51
kafu(金币+5,VIP+0): 10-16 11:42
有这样可能就是的纯化试剂(盒)污染了,导致片段被酶解
爱人者被爱,敬人者人敬
2楼2009-10-12 12:48:50
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lixiahe

银虫 (小有名气)


kafu(金币+1,VIP+0):4 10-13 10:58
可以用一种已知长度单一条带的片段,先做elution,在跑胶,若仍然出现杂带,则可以说明是试剂盒污染导致。否则还要寻找其它原因。
另外也可以更换试剂盒试试。
天天小木虫
3楼2009-10-12 13:43:28
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jjlbest

木虫 (著名写手)


kafu(金币+1,VIP+0): 10-16 11:43
同意二楼的做法!
4楼2009-10-14 13:20:06
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