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科研小努力

新虫 (小有名气)

[交流] 免疫组化常见问题分析 已有2人参与

1. IHC实验结果显色过深

一抗浓度过高或孵育时间过长——降低一抗浓度或减少孵育时间

孵育温度过高——选择4℃或室温孵育

2. 实验结果存在非特异性显色

石蜡切片脱蜡不彻底——延长脱蜡时间

蛋白封闭不充分——增加蛋白封闭时间

组织富含内源性生物素与过氧化物酶——使用相关试剂进行封闭

3. 实验结果显色弱或无染色

一抗浓度过低或孵育时间过短——增加一抗浓度或延长孵育时间

组织中无目的抗原的表达

一抗种属来源与二抗不匹配

注意事项

切片脱蜡和水化要充分,加反应液时要覆盖组织充分;每次加液前甩干洗涤液,同时防止干片。

一抗的冲洗原则:单独冲洗,防交叉反应污染;温柔冲洗,防止切片脱落;推荐浸洗方式。

有条件的话最好立即拍照,若不能及时拍照,也要封好片和用指甲油封固,保持避光和湿度。
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木槿1357

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 木槿1357 at 2023-12-20 18:07:31
你好,请问一下,这种是不是没染上啊

这种
免疫组化常见问题分析



发自小木虫Android客户端
3楼2023-12-20 18:07:59
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木槿1357

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,请问一下,这种是不是没染上啊

发自小木虫Android客户端
2楼2023-12-20 18:07:31
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AYoY

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 木槿1357 at 2023-12-20 18:07:59
这种

...

不清楚你这个抗体染色定位是什么,看起来胞质有一些些染色,但是更像背景,核和膜都没有染色,可能是没染上,那一大块深色像是背景
4楼2024-07-15 16:44:44
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