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科研小努力

新虫 (小有名气)

[交流] PAS染色

一、简介


PAS(Periodic Acid-Schiff stain)染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质,还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。其原理是过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。

二、染色流程


1. 切片常规脱蜡至水;



2. 蒸馏水洗1-2min;



3. 高碘酸溶液氧化10min;



4. 蒸馏水洗,甩去多余水分;



5. 雪夫(schiff)试剂染色10-15min;



6. 流水冲洗,甩去多余水分;



7. 苏木素染液染核2-4min;



8. 流水冲洗反蓝3-5min,甩干多余水分;



9. 常规脱水透明,中性树胶封固。

三、染色结果


霉菌、糖原、中性粘液物质呈红色,胞核呈蓝色。

四、注意事项


1. 苏木素染液建议常温放置,染色更加;



2. 雪夫试剂临用前半小时取出恢复室温,未染色试剂出现淡红色不能使用;



3. 如试剂盒储存在2-8°C环境下,染色过程中试剂出现淡红色属于正常现象;



4. 雪夫试剂染色时间随室温而定,夏季室温高,作用10min即可,冬季室温低,则可延长至20min,雪夫试剂染色要避光;



5. 操作时做好防护,避免溅眼;



6.超过有效期不可使用。

五、 临床应用


随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加广泛,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质 ,心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ,糖原累积病诊断和研究 ,糖尿病的诊断和研究 ,用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外 ,还可以观察肾小球基底膜 、结肠杯状细胞 中性黏液物质 、阿米巴滋养体和霉菌的着色,为临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据。
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