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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 考马斯亮蓝测蛋白含量时用的牛血清白蛋白
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fszwl

新虫 (初入文坛)

[交流] 考马斯亮蓝测蛋白含量时用的牛血清白蛋白

请问测标准曲线时，用的牛血清蛋白为1mg/ml的可以吗？与0.1mg/ml的有区别吗？会影响标准曲线的测定吗？
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1楼2009-10-11 14:32:50
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fszwl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-10-11 14:46:


楼主，你做的标线要从0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0都要有啊，直到不成线性为止，要做3个平行重复。

奥？您的意思是说每一种浓度的标准液都做一下选线性最好的一个吗？我是先配制1mg/ml的牛血清白蛋白标准液，然后分别取0、10、20、40、60、80、100微升，加水到1ml，然后加5ml考马斯
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3楼2009-10-11 18:46:55
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HarveyWang

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海外行者
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Originally posted by fszwl at 2009-10-11 14:32:
请问测标准曲线时，用的牛血清蛋白为1mg/ml的可以吗？与0.1mg/ml的有区别吗？会影响标准曲线的测定吗？

楼主，你做的标线要从0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0都要有啊，直到不成线性为止，要做3个平行重复。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-10-11 14:46:19
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HarveyWang

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海外行者
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Originally posted by fszwl at 2009-10-11 18:46:

奥？您的意思是说每一种浓度的标准液都做一下选线性最好的一个吗？我是先配制1mg/ml的牛血清白蛋白标准液，然后分别取0、10、20、40、60、80、100微升，加水到1ml，然后加5ml考马斯

你首先去查一下，什么才是标准曲线的做法！

标准曲线就是：不同加量的物质===反应===形成一系列吸光值====然后看看他们之间的关系。
形成的线越直，你做的标准曲线越好。

例如：
对于1g/L 的BSA溶液，
分别取0、10、20、40、60、80、100微升 反应后，
比如得到的吸光值为 0，0.1，0.2，0.38，0.59，0.76，0.85.
去做线性关系（现在就去做！），
发现最后一个数值不好成比例关系，就不用了，
前面的0--80ul的成线性，以后就在0-0.76范围内测定蛋白浓度啊！
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-10-11 21:13:44
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