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fszwl

新虫 (初入文坛)

[交流] 考马斯亮蓝测蛋白含量时用的牛血清白蛋白

请问测标准曲线时,用的牛血清蛋白为1mg/ml的可以吗?与0.1mg/ml的有区别吗?会影响标准曲线的测定吗?
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fszwl

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-10-11 14:46:


楼主,你做的标线要从0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0都要有啊,直到不成线性为止,要做3个平行重复。

奥?您的意思是说每一种浓度的标准液都做一下选线性最好的一个吗?我是先配制1mg/ml的牛血清白蛋白标准液,然后分别取0、10、20、40、60、80、100微升,加水到1ml,然后加5ml考马斯
3楼2009-10-11 18:46:55
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HarveyWang

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
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Originally posted by fszwl at 2009-10-11 14:32:
请问测标准曲线时,用的牛血清蛋白为1mg/ml的可以吗?与0.1mg/ml的有区别吗?会影响标准曲线的测定吗?

楼主,你做的标线要从0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0都要有啊,直到不成线性为止,要做3个平行重复。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-10-11 14:46:19
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HarveyWang

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海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by fszwl at 2009-10-11 18:46:

奥?您的意思是说每一种浓度的标准液都做一下选线性最好的一个吗?我是先配制1mg/ml的牛血清白蛋白标准液,然后分别取0、10、20、40、60、80、100微升,加水到1ml,然后加5ml考马斯

你首先去查一下,什么才是标准曲线的做法!

标准曲线就是:不同加量的物质===反应===形成一系列吸光值====然后看看他们之间的关系。
形成的线越直,你做的标准曲线越好。

例如:
对于1g/L 的BSA溶液,
分别取0、10、20、40、60、80、100微升 反应后,
比如得到的吸光值为 0,0.1,0.2,0.38,0.59,0.76,0.85.
去做线性关系(现在就去做!),
发现最后一个数值不好成比例关系,就不用了,
前面的0--80ul的成线性,以后就在0-0.76范围内测定蛋白浓度啊!
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-10-11 21:13:44
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