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成都暴雨

新虫 (小有名气)

[求助] 双荧光报告基因系统的构建

最近在做T细胞和肿瘤相关的实验,需要构建一个双荧光报告基因系统来进行药物筛选。构建质粒时在载体的选择上有什么讲究吗?筛选上调该蛋白表达的药物时需要导入质粒的基因片段是该蛋白的转录子还是该蛋白的结合位点呢?谢谢各位大佬!!!祝大家天天发CNS。

@lifeliuyan 发自小木虫Android客户端
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成都暴雨

新虫 (小有名气)

4楼2023-11-10 13:37:33
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yanghu01

新虫 (正式写手)

兄弟是哪个学校,哪个课题组的呀,可以打听一下嘛

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2楼2023-11-10 08:27:11
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fillful

新虫 (初入文坛)

你这个都不太对,你应该做的是药物能上调某个基因的表达,所以双荧光素酶实验需要做的就是把目标蛋白的启动子放在fluc的前面,将原来的启动子序列去掉。这样子你的药物在细胞内发挥作用时,萤火虫的荧光信号就会增强。

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3楼2023-11-10 09:10:26
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成都暴雨

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fillful at 2023-11-10 09:10:26
你这个都不太对,你应该做的是药物能上调某个基因的表达,所以双荧光素酶实验需要做的就是把目标蛋白的启动子放在fluc的前面,将原来的启动子序列去掉。这样子你的药物在细胞内发挥作用时,萤火虫的荧光信号就会增强 ...

谢谢老师

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5楼2023-11-10 13:42:47
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