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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求职】菌悬液
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wxstongxue6161

木虫 (正式写手)

[交流] 【求职】菌悬液

各位大侠，问问大家在用无菌水冲洗斜面制成霉菌的孢子悬液的时候（15*150的试管），大家在自己的时候过程中，用以冲洗斜面的无菌水的体积是多少？谢谢
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给自己一片悬崖,让自己无路可退.
1楼 2009-10-10 22:55:12
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pamela9838

铜虫 (小有名气)
★
wxstongxue6161(金币+1,VIP+0): 10-11 08:36
1mL就可以吧，我是那么觉得的，这个也没有具体的规定吧
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2楼2009-10-10 23:59:14
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wxstongxue6161

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by pamela9838 at 2009-10-10 23:59:
1mL就可以吧，我是那么觉得的，这个也没有具体的规定吧

用1ml无菌水冲洗斜面 ？是不是太少了，那取从多少毫升接种啊？
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给自己一片悬崖,让自己无路可退.
3楼2009-10-11 08:36:23
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free-fish

铜虫 (正式写手)
又是菌种浓度的问题，偶也头疼！应该依据你接种的浓度而定吧，老测OD值或者计数很麻烦，哦哦
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4楼2009-10-11 08:56:21
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pamela9838

铜虫 (小有名气)
也不少了，其实孢子的浓度会很高的，你可以数一下。对啊，你接种的要求是百分之多少也有关系吧
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5楼2009-10-13 13:05:58
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★ ★
wxstongxue6161(金币+3,VIP+0): 10-13 17:07
引用回帖:
Originally posted by free-fish at 2009-10-11 08:56:
又是菌种浓度的问题，偶也头疼！应该依据你接种的浓度而定吧，老测OD值或者计数很麻烦，哦哦

测个孢子混悬液的OD值还嫌麻烦？！
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
6楼2009-10-13 14:12:03
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
Originally posted by wxstongxue6161 at 2009-10-11 08:36:


用1ml无菌水冲洗斜面 ？是不是太少了，那取从多少毫升接种啊？

是拿灭菌的竹针或其他工具，将斜面的孢子刮下一些来，
放到1-5 mL的灭菌水里，混匀，
然后测OD600值，大体估计孢子浓度，
以后就可以大体估计加样的孢子数量了。

例如 0.2 OD*1 mL = 0.4 OD * 0.5mL
当然，你最好将1mL 1.0 OD的混悬液中的孢子数计算出来，
方法就是：稀释一系列梯度后涂平板

这个可是一劳永逸的办法哦
这个我做过青霉的，但具体数据我忘了，你自己做一遍吧，好像是在10的-4和-5梯度附近,50-200个/100 uL。10的-1---- -3就别涂平板了，会长很多的。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-10-13 at 14:34 ]
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
7楼2009-10-13 14:17:27
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
Originally posted by wxstongxue6161 at 2009-10-10 22:55:
各位大侠，问问大家在用无菌水冲洗斜面制成霉菌的孢子悬液的时候（15*150的试管），大家在自己的时候过程中，用以冲洗斜面的无菌水的体积是多少？谢谢

在这个链接里有回答
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1576212&pid=15895046&page=5
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-10-13 14:54:07
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raindrop8316

金虫 (正式写手)
★
wxstongxue6161(金币+1):谢谢参与
看你做的什么菌啊，有的菌产孢子很多的，而且跟孢子大小也有关系。
我们一般加5ml无菌水，因为在洗斜面的时候水会有些损失，倒出来大概有4ml多一点。
如果需要精确的孢子浓度，用血球计数板数一下不就行了吗？这个比测OD值要准确

[ Last edited by raindrop8316 on 2009-10-14 at 09:42 ]
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书到用时方恨少 钱到月底不够花
9楼2009-10-14 09:41:48
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wxstongxue6161

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-10-13 14:17:


是拿灭菌的竹针或其他工具，将斜面的孢子刮下一些来，
放到1-5 mL的灭菌水里，混匀，
然后测OD600值，大体估计孢子浓度，
以后就可以大体估计加样的孢子数量了。

例如 0.2 OD*1 mL ...

我的有些霉菌菌丝很多，很难刮下来，这时该怎么办？
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给自己一片悬崖,让自己无路可退.
10楼2009-10-15 19:04:59
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