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peaksummer

新虫 (初入文坛)

[交流] 弱弱问一个关于摇菌的问题

我挑克隆摇菌都是在试管里装4ml的LB,今天被隔壁实验室一个大老板看到了,她说应该用两毫升的,问一个师兄他也说要用两毫升摇12小时。请教各位大侠,为什么非要是2毫升呢?
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只是偶然 只是相遇 只是我无法忘记
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jjlbest

木虫 (著名写手)

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amisking(金币+2,VIP+0): 10-11 12:49
是的,一般培养基的体积可根据你的用量来改变,如果用来做菌落PCR,20ul体积足够,用来摇菌提取质粒酶切的话2ml也就够用了,你想大量的提取质粒,当然可以适当的增加体积,所以我认为用多少体积的LB没有强制行的规定。
5楼2009-10-11 11:17:07
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houcaixia

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们一般挑去克隆摇菌时,一般都是先在30ul的水中混匀,然后就是按1%的体积来摇菌,也就是说摇3mlLB培养基来摇菌,主要是根据菌液的浓度来决定的。
2楼2009-10-11 09:52:22
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by peaksummer at 2009-10-10 22:01:
我挑克隆摇菌都是在试管里装4ml的LB,今天被隔壁实验室一个大老板看到了,她说应该用两毫升的,问一个师兄他也说要用两毫升摇12小时。请教各位大侠,为什么非要是2毫升呢?

不一定要用2ml的吧,我们是用4ml的,2ml的有点少了,如果所需质粒较浓并且质粒拷贝数较低的话,从2ml中抽质粒有点不够吧!她建议用2ml可能主要是为了节省材料吧!
3楼2009-10-11 10:01:51
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★
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引用回帖:
Originally posted by peaksummer at 2009-10-10 22:01:
我挑克隆摇菌都是在试管里装4ml的LB,今天被隔壁实验室一个大老板看到了,她说应该用两毫升的,问一个师兄他也说要用两毫升摇12小时。请教各位大侠,为什么非要是2毫升呢?

楼主用的是 10 mm 还是 20 mm 内径的管子?

由于试管通气量很差,4ml 摇起来更容易缺氧。。。摇不动啊。。

2ml 菌液一般足够用的,而且总菌量不一定会比 4ml的少。。。
当然。。。你非用4ml也没有什么大不了的。。。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-10-11 10:56:17
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