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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 弱弱问一个关于摇菌的问题
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peaksummer

新虫 (初入文坛)

[交流] 弱弱问一个关于摇菌的问题

我挑克隆摇菌都是在试管里装4ml的LB，今天被隔壁实验室一个大老板看到了，她说应该用两毫升的，问一个师兄他也说要用两毫升摇12小时。请教各位大侠，为什么非要是2毫升呢？
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只是偶然 只是相遇 只是我无法忘记
1楼 2009-10-10 22:01:39
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jjlbest

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 10-11 12:49
是的，一般培养基的体积可根据你的用量来改变，如果用来做菌落PCR，20ul体积足够，用来摇菌提取质粒酶切的话2ml也就够用了，你想大量的提取质粒，当然可以适当的增加体积，所以我认为用多少体积的LB没有强制行的规定。
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5楼2009-10-11 11:17:07
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houcaixia

金虫 (小有名气)
★
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我们一般挑去克隆摇菌时，一般都是先在30ul的水中混匀，然后就是按1%的体积来摇菌，也就是说摇3mlLB培养基来摇菌，主要是根据菌液的浓度来决定的。
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2楼2009-10-11 09:52:22
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by peaksummer at 2009-10-10 22:01:
我挑克隆摇菌都是在试管里装4ml的LB，今天被隔壁实验室一个大老板看到了，她说应该用两毫升的，问一个师兄他也说要用两毫升摇12小时。请教各位大侠，为什么非要是2毫升呢？

不一定要用2ml的吧，我们是用4ml的，2ml的有点少了，如果所需质粒较浓并且质粒拷贝数较低的话，从2ml中抽质粒有点不够吧！她建议用2ml可能主要是为了节省材料吧！
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3楼2009-10-11 10:01:51
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 10-11 11:04
amisking(金币+1,VIP+0): 10-11 12:49
引用回帖:
Originally posted by peaksummer at 2009-10-10 22:01:
我挑克隆摇菌都是在试管里装4ml的LB，今天被隔壁实验室一个大老板看到了，她说应该用两毫升的，问一个师兄他也说要用两毫升摇12小时。请教各位大侠，为什么非要是2毫升呢？

楼主用的是 10 mm 还是 20 mm 内径的管子？

由于试管通气量很差，4ml 摇起来更容易缺氧。。。摇不动啊。。

2ml 菌液一般足够用的，而且总菌量不一定会比 4ml的少。。。
当然。。。你非用4ml也没有什么大不了的。。。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-10-11 10:56:17
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