怎样确定基因的转录起始位点 - 分子生物 - 综合其他 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

11楼2009-10-11 08:08:50

anlewo7777

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我的看法是如果你想使用该启动子，那你直接扩增atg前面的若干长片段就行了，如果是就是研究启动子，那你就要老老实实的做突变然后在后面挂上标记基因，做检测。
这里说若干长片段是因为你没说清楚你的研究对象是原核还是真核的，至于启动子的特征，有好多的质粒构建的书里都有介绍什么盒什么盒之类的应该很好找。祝实验顺利！
ps：我觉得所谓的不厚道的是帮你顶贴，不让他们也关注的帖子沉下去。

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12楼2009-10-11 08:56:26

hongkaichen

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帮顶一下，也想知道启动子怎么找？

13楼2009-10-11 09:09:42

银杏下

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LZ注意转录起始位点并不是从ATG开始的，ATG只是翻译起始位点，一般转录起始位点位于启动子和核糖体结合位点（rbs序列）之间，在E.coli中rbs序列之前30-40bp左右就包含了启动子，不同物种会有差异。

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14楼2009-10-11 09:22:46

xuezhen

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关注一下，学习学习！

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15楼2009-10-11 09:27:30

zhjzhou

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据我所知ATG前1.5-2kb是启动子，一般情况是这样

16楼2009-10-11 09:38:23

zuodongyun

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转录不是从ATG开始的，在没有实验分析的情况下，只有通过生物信息学的相关软件分析，预测转录起始位点，在根据预测结果设计实验验证

17楼2009-10-11 10:23:12

yuehuashou

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mRNA合成以后存在剪切，成熟mRNA的第一个碱基不一定是转录的起始碱基。

18楼2009-10-11 10:32:57

寒山拾得

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已知基因就是mRNA第一个碱基，AUG是翻译起始点。
未知基因做RACE

19楼2009-10-11 10:59:30

ivyxiao

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引用回帖:

Originally posted by anlewo7777 at 2009-10-11 08:56:
我的看法是如果你想使用该启动子，那你直接扩增atg前面的若干长片段就行了，如果是就是研究启动子，那你就要老老实实的做突变然后在后面挂上标记基因，做检测。
这里说若干长片段是因为你没说清楚你的研究对象是 ...

我需要得到的是真核生物启动子，研究该启动子，后面挂上的是荧光素酶基因。所以通常扩增ATG前多长片段啊？

[ Last edited by ivyxiao on 2009-10-11 at 21:42 ]

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20楼2009-10-11 21:35:26