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andy99990000

木虫 (初入文坛)

[交流] 谈谈凝胶电泳的一点感想吧~

1.溴化乙锭(EB)为致癌剂,操作时应戴手套,尽量减少台面污染。
2.凝胶放入呈像仪的过程中,切记擦干托盘,防止含EB的缓冲液滴溅。
3.DNA构象:一般迁移速率超螺旋环状>线状DNA。当条件变化时,情况会相反,还与琼脂糖的浓度、电流强度、离子强度及EB含量有关。
4.所加电压:低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比,使分辨效果好,凝胶上所加电压不应超过5V/cm 。
5.电泳缓冲液 (0.5×TBE)的组成及其离子强度影响DNA的迁移率,无离子存在时,核酸基本不泳动,离子强度过大产热厉害,熔化凝胶并导致DNA变性,一般采用1×TAE,0.5×TBE,1×TPE(均含EDTA pH8.0)。
先写这么多,想到再补充了,嘿嘿~
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

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3楼2009-10-10 21:36:36
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