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微生物检测实验倒平板的小技巧
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实验中相信大家都经常要倒平板吧？初学者往往都倒不好，导致后续实验出现问题。这里总结几点小技巧供大家参考： 一、培养基倾注温度 1、培养基的倾注时适宜温度约45℃。培养基置手心感觉不烫，但是置手背感觉烫时，培养基温度大约就是45℃。培养基倾注时温度太高的话，凝固时间较长，另外皿盖上会有大量冷凝水，不利于后续实验。温度太低则容易出现倒板过程中瓶中培养基部分凝固的现象。 2、有些培养基需要加入添加成分，这些添加成分在加入前应先放置到室温，避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。 3、目前多数实验室培养基灭菌后会放置水浴或者烘箱中，需使用的时候拿出来直接倒板。但培养基静置时间不宜过长，静置时间一般不超过4小时。静置时间过长，培养基中琼脂可能会少量凝固，形成类似絮状析出。 4、在实验过程中不可避免因特殊情况而导致未倒板培养基已凝固，凝固后培养基可重新加热溶解。一般来说沸水浴或者电磁炉加热，不能重新再灭一次菌。 二、培养皿中有冷凝水 一般来说，难以避免都会有几滴，影响不大。如果过多则需要注意。 1、当需要表面接种，需要吹干平板表面冷凝水，否则容易产生蔓延菌落。可放在有对流的无菌净化台中吹干培养基表面，但不能过度干燥，否则培养过程中平板容易开裂。 2、如果是进行倾注平板计数，则可在凝固后的琼脂表面再覆盖一薄层琼脂培养基即可。 三、平板倾注量 一般平板倾注量在18-20ml左右，如果培养时间超过48小时或者是培养温度高于40℃，为防止水分过量蒸发导致平板开类，倾注量一般是25ml左右。一些培养皿会有刻度，按照刻度倾注即可。 四、平板气泡 倒板过程中容易出现气泡，特别是像BS琼脂这类需要摇匀后倒板的培养基。气泡过多的话会影响结果观察，倒平板时尽量缓慢倒入，将气泡留在瓶子底部。平板中有少量气泡的话，可以把气泡摇到平板壁上，这样不会影响结果观察。 公众号：毕合生物 毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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