| 查看: 306 | 回复: 1 | |||
Sh毕合生物
|
[交流]
双抗体夹心法介绍已有1人参与
|
|
双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。那么，为什么双抗体夹心法是检测抗原常用的方法? 1、将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2、加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。 洗涤除去其他未结合物质。 3、加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合 的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。 4、 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。 在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、 AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包备固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标用的抗体分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相 载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。 在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标 抗体结合，而不再形成夹心复合物。类同于沉淀反应中抗原过剩的后代现象，此时反应 后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同。 作者：毕合生物 公众号：毕合生物 毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
回复此楼» 猜你喜欢
求Sci期刊推荐
已经有7人回复
-
B口人才项目
已经有17人回复
-
博后特别资助状态变化
已经有35人回复
-
数理的人才答辩通知发了吗
已经有7人回复
-
化学口B0109(高分子合成)，拿青年基金一般需要怎样的文章水平？
已经有20人回复
-
讨厌酒桌文化
已经有6人回复
-
申博求助?本硕双非一篇三区和四区去985工科非天坑专业有没有希望？
已经有6人回复
-
双非本科毕业论文，气人
已经有7人回复
-
求生物学的博导收留
已经有4人回复
-
选择
已经有6人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
|
感谢分享 发自小木虫Android客户端 |
2楼2023-10-17 15:30:05
5