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动物造模 动物实验 --牙周炎动物模型构建
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牙周炎(periodontitis)是一种常见的牙齿周围组织即牙龈、牙槽骨、牙周膜和牙骨质破坏的慢性感染性疾病，目前普遍认为菌斑微生物及其产物在局部的堆积和浸润是牙周炎发生、发展的关键因子。随着医学知识的普及和人们对口腔健康重视程度的加深，牙周炎作为一项发病率极高且影响广泛的口腔疾病，其防治工作迫在眉睫。建立正确合理的动物模型，有利于深入研究影响牙周炎发生发展的关键因素，为疾病的控制、药物研发提供思路，从而开展积极有效的临床防治工作。 动物的选择 一般选择2~4月龄的SD大鼠和Wistar大鼠，后者性情更为温顺些。因大鼠繁殖率较高，饲养成本较低，有足够的数量进行研究和统计分析，又因其生命周期短，适应能力及抗病能力强，可快速诱发疾病，是目前应用最广泛的动物，尤其适用于测试各种药剂缓解炎症的功效。 但大鼠牙周病发病率远低于人，且牙齿小，对操作和观察有一定影响，同时因大鼠的牙齿能持续不断的生长，只适合短时程的实验研究。 造模方法 一结扎线法 目前单纯利用该法构建动物牙周炎模型的技术已相当成熟，在各种牙周病的研究中均得到广泛使用。 造模方法： 选取SD大鼠，大鼠用10％水合氯醛麻醉，麻醉剂量0.2mL/100g，然后用尖头探针将第二磨牙的牙龈分离，用缝线在龈沟内结扎，15d后进行组织学观察，确定建模是否成功。 Tips： 结扎材料有尼龙线、细丝线、橡皮圈、正畸用钢丝等，其中正畸不锈钢丝结扎的效果最好，成功率更高。 在建模过程中要定期检查结扎材料是否脱落，或根据需要进行更换。 此方法在结扎时可拨离牙颈处包裹的牙周组织，从而造成轻微的机械性损伤。 二 图片 高糖黏性食料喂饲联合其他方法 采用高糖低蛋白饲料饲养时，实验动物会有牙周袋产生、牙槽骨吸收和炎性细胞浸润等病理变化，但单独使用此法建模效果一般，且耗时较长。现阶段，高糖黏性食料喂饲常与其他手段联合使用，辅助诱导动物牙周炎的形成，或用于伴糖尿病牙周炎动物模型的研究，可更好地模拟临床上相应患者的发病机制。 造模方法： Wistar大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉。 用牙科探针分离第一、二磨牙牙间间隙，采用直径为0.2mm的正畸不锈钢丝结扎大鼠双侧上颌第一磨牙牙颈部，用持针器夹持结扎丝从大鼠上颌双侧第一磨牙远中腭侧进入，环绕上颌第一磨牙一周后，在腭侧偏近中处结扎固定，结扎丝末端保留3mm回弯置于龈下，防止结扎丝划伤口腔内软组织，且不损伤牙龈的结合上皮。 术后严密观察大鼠的状态，从实验当天起喂食糖水，12小时后进食，每天高糖饮食喂养( 饮用水为10%葡萄糖水，饲料为10%葡萄糖水浸泡变软的常规饲料。术后每周检查牙周结扎情况，并观察牙周组织的状况。 三 图片 注射脂多糖（liposaccharide, LPS） 造模方法： 选取Wistar大鼠，大鼠下颌第二磨牙牙龈内单独注射LPS 10μg/μl, 并于第3、7、10天分批处死动物，取下颌骨分别进行组织学和免疫细胞化学分析。 模型验证： 单独注射LPS, 在第7天和第10天能够引起典型的牙龈和牙周炎症：渗出液明显增多, 结合上皮根方迁移, 牙槽间隔的骨丧失, 破骨细胞活跃。在注射后的第10天, 下颌骨的两侧均可见到显著的骨丧失趋势。 总结 虽然牙周炎动物模型为牙周炎疾病提供了大量重要数据，但其研究结果只能提供某种新型药物安全性和潜在功效的初步信息，不能直接将这些结果等同于人类牙周炎的结果。另外，全身因素导致的个体差异很难解释，一些口腔卫生习惯差的群体并未表现出牙周炎症，而某些口腔菌斑较少的人却患上严重的牙周炎。真正能够模拟人类牙周病自然发病机制、实用且重复性高的模型还亟待进一步探索和研发。 来源： [1]唐彩金,曾启新,方梅飞,等. 消退素 D1 治疗实验性大鼠牙周炎的研究[Ｊ]. 口腔医学研究, 2017,33（12）：1270-1273. [2]Nassar PＯ,Felipetti FA,Nassar CA,et al. Evaluation of effect of cyclosporine A on the bone tissue with induced periodontal disease to ligature in rats[Ｊ]. Transplant Proc,2013,45（2）：778-782. |
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