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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 非变性裂解液提取蛋白失败
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timmyVVV

铁虫 (小有名气)

[求助] 非变性裂解液提取蛋白失败

我构建了ha蛋白标签菌株。前期验证的时候是用变性裂解液提取的，HA蛋白信号挺强的，几秒钟就可以曝光出来。
但是当我用非变性裂解液np40，ripa弱，wb&ip裂解液提取的时候，发现检测不到这个ha的信号。重复了几次都是这个结果
我后面可是要做co-ip的啊，为什么用非变性裂解液提取蛋白之后检测不到信号啊

@biostar2009 @wizardfan @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
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1楼 2023-09-30 23:57:51
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fengxueren

新虫 (正式写手)
裂解

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2楼2023-10-01 01:20:57
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timmyVVV

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fengxueren at 2023-10-01 01:20:57
裂解

裂解是加了细玻璃珠，用破碎仪，6m/s，破碎裂解的

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3楼2023-10-01 11:11:14
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fengxueren

新虫 (正式写手)
裂解时间？不要破碎仪

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4楼2023-10-04 00:39:31
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timmyVVV

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fengxueren at 2023-10-04 00:39:31
裂解时间？不要破碎仪

每轮破碎40s，每两轮在冰上静置5min。为什么不用破碎仪呢？

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5楼2023-10-07 10:41:37
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