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影响细胞转染的因素
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1、血清：血清影响复合物的形成，降低转染效率。 阳离子脂质体和DNA的最佳量在使用血清时会有所不同，因此想在转染培养基中加入血清时要进行条件优化。大部分细胞可以在无血清培养基中几个小时内保持健康。 2、抗生素：比如青霉素和链霉素，是影响转染的培养基添加物。这些抗生素一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使抗生素可以进入细胞。这降低了细胞的活性，导致转染效率低。 3、细胞代数：转染前细胞最好经过1-2次传代保证细胞生长旺盛容易转染，注意贴壁细胞一旦长满就不好转染。 4、细胞铺板密度：一般转染时，贴壁细胞密度为70%-90%，悬浮细胞密度为2*10^6--4*10^6 细胞/ml 时效果较好。确保转染时细胞没有长满或处于静止期。铺板细胞数目的增加可以增加转染活性和细胞产量。 5、DNA质量：DNA质量对转染效率影响非常大。一般的转染技术基于电荷吸引原理，如果DNA不纯，如带少量的盐离子，蛋白，代谢物污染都会显著影响转染复合物的有效形成和转染的进行。 |
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