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ChIP原理及应用方向
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通过甲醛将染色质上的DNA和目的蛋白交联; 通过超声或酶解的方法将染色质片段化; 包含有目的蛋白的染色质片段通过抗体富集纯化; 通过加热解除DNA和目的蛋白的交联; 通过蛋白酶和RNA酶消化去除目的染色质的蛋白和RNA之后,将目的DNA纯化出来; 得到的DNA可以通过PCR检测目标区域的DNA是否被目的蛋白富集,或者通过DNA测序的方式检测目的蛋白在全基因组上的分布; ChIP原理看似简单,但要想做好ChIP ,得到高质量的数据却绝非易事。 ChIP的应用方向: 1、DNA甲基化 2、蛋白质甲基化 3、组蛋白修饰 |
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