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lili1130

[交流] 关于TA克隆的求助

做TA克隆时,由于PCR结果很不稳定,所以直接用PCR产物直接跟T-18载体连接,我的PCR产物结果较好,目标片段长度约1.1KB,电泳时看不出非特异扩增,有引物二聚体。
克隆后,用菌液PCR检测,但是检测结果扩出的条带只有300KB左右。
想问问大家,这是什么原因?
非常谢谢!

[ Last edited by amisking on 2009-10-10 at 08:40 ]
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nancysea

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 10-10 22:25
amisking(金币+5,VIP+0):鼓励新虫发帖交流! 10-10 22:26
PCR会有假阳性,有时候酶切鉴定更准确,你酶切片段确定一下真的插入片段是300左右,然后在考虑改进方法,试验还要具体描述下,才能给你更好的办法
10楼2009-10-10 16:10:01
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