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Sh毕合生物

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[交流] 移液器操作六部曲，别再犯这些小错误!已有1人参与

　　移液枪是实验操作上不可缺少的工具，对于顶尖高手而言，重要的就是实验的误差最小，重复再现性好，那就要注意正确移液枪使用，避免因小失大。

　　一.移液六部曲

　　1.装吸头

　　移液器套柄用力下压，需要时小幅度旋转即可。

　　错误操作：

　　用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损，从而影响其密封性。

　　2.量程设定

　　操作之前请先选择正确的移液器，移液器可在10～100%量程范围内操作，但在10%量程处操作对于移液技巧要求高，故推荐在35～100%量程范围内操作。

　　量程调节：

　　当由小量程调节至大量程时，朝所需量程方向连贯旋转，旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时，直接连贯旋转至所需量程。

　　3.润洗

　　用同一样品重复吸液排液二至三次，润洗为以后每次吸液提供相同的接触面，保证操作的一致性。

　　注意：高温或者低温液体请不要润洗!

　　4.吸头浸入角度

　　吸液时尽量保持垂直状态，倾斜角度不能超过20°

　　5.吸头浸入深度

　　6.吸头浸入时间

　　吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开，这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。

　　7.吸液速度

　　匀速连贯移液，控制好移液速度，太快会造成喷液，液体或者气雾冲入移液器内部，污染活塞等部件。

　　8.排液及吹液

　　先将活塞按至第一档排液，略作停顿后按至第二档进行吹液。

　　排液四种方式：

　　9.手温

　　移液器不宜长时间握在手里，不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。

　　二.移液枪使用诀窍

　　1.影响移液枪精度因素

　　(1)温度：

　　室温低时，手温较高，使得空气膨胀，吸入冷溶液时往往发生误差;

　　(2)气密性：

　　tip和枪体的结合部，以及枪内柱体之间的长期磨损，造成误差;

　　(3)吸速：

　　容易造成tip内气泡产生，而且会污染枪头;

　　(4)试剂的挥发：

　　吸挥发性高的试剂时，蒸汽进入枪头，内压增高，结果在压出液体时，压力变大，而产生误差;

　　解决办法：

　　反复抽吸4～5次就可改善。

　　2.使用注意事项

　　(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气;

　　(2)为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为，吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，造成排液量偏小而产生误差;

　　(3)浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定;

　　(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1mL蒸馏水20℃时重0.9982g;

　　(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的，长期操作会使内部零件松散而损坏移液器;

　　(6)移液器未装吸头时，切莫移液;

　　(7)在设置量程时，请注意，旋转到所需量程，数字清楚显示在窗中，所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则，会卡住机械装置，损坏移液器。

　　(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如，浓酸、浓碱、有机物等)。

　　(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。

　　(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。

　　三.移液器错误操作及处理方法

　　做为液体操作中最常用的手动可调精密移液器，在使用过程中有些错误的操作会给操作本身带来误差，有些会造成机器的损坏等，在这里简单总结如下：

　　错误：装配吸头时用移液器反复撞击吸头，以上紧;

　　正确：插入吸头，左右轻转旋转上紧吸头;

　　分析：撞击会造成移液器内部齿轮组合的松动，长期操作会对移液器的精确性造成影响;

　　错误：吸头与移液器不匹配，影响气密性;正确选用与移液器匹配、有质量保证的吸头;

　　分析：吸头的不匹配，主要表现为对气密性的影响。会直接影响移液器的精确性，通常会移液操作会小于设定量;

　　错误：吸液时，移液器倾斜吸液;

　　正确：垂直吸液;

　　分析：倾斜的状态会造成气压面的改变。会对移液精度造成影响;

　　错误：吸头内含有未打出的液体时，移液器平置于桌面;

　　正确：将移液器垂直挂在移液器支架上;

　　分析：吸头内含有未打出液体，移液器平放之后液体有可能会流到移液器体内部，这会对移液器内部组件造成影响，严重的回造成损坏，较差污染等情况的发生;

　　错误：用大量程的移液器移取小体积的液体;

　　正确：移液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合不准确度和不精确度的要求;

　　分析：因为空气垫的存在，是造成移液器不准确度的主要原因。移液器的选择应该是最大量程，最接近目的液体转移量的选型原则;

　　错误：吸取具有强挥发性的液体;

　　正确：不建议用普通移液器做强挥发型液体转移;

　　分析：如果一定要移取强挥发性的液体，应该在移液结束后立刻拆开移液器，让蒸汽挥发，同时，建议使用外置活塞式移液器;

　　错误：吸液速度和放液速度过快;

　　正确：慢吸慢放;

　　分析：快吸对于1mL及以上量程的移液器，很容易造成液体上冲，过快的放液会增加液体的残留量。

作者：毕合生物

公众号：毕合生物

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