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googoog铜虫 (正式写手)
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请教计算荧光量子产率的方法
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我想知道计算荧光量子产率时，配制待测物和标准物质有什么需要注意的事项？ 选取标准物质有什么要求？ 两种溶液配制时是否必须用相同的溶剂？ 真诚请教，请帮忙，谢谢！！ [ Last edited by googoog on 2009-10-9 at 19:17 ] |
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荧光量子产率是荧光发射的光子占吸收的光子的比率。换句话说荧光量子产率指的是激发态是以荧光的方式失去的活性，而不是以其他状态失去的活性。计算荧光产率最可靠的方法是比较法，即与已知量子产率的标准样品进行比较的方法。实质上指的是标准样品与被测样品在相同的激发波长下有完全相等的吸光度以确保它们吸收相同的光子数，这样，两种溶液的荧光强度的积分面积的比率就是它们量子产率的比值。 举例：将罗丹明6G配成0．05mol/L的乙醇溶液，然后用乙醇再稀释到合适的五种浓度，在狭缝1nm、吸收池光程为10nm的条件下进行紫外可见吸收光谱扫描，记录在激发波长350nm下的吸光度值，然后相同的溶液在350nM激发，激发狭缝为10nm，发射狭缝为20nm，在400—700nm进行发射光谱扫描，记录下每次测得的荧光发射峰荧光强度的积分面积；待测的量子点溶液用水稀释到合适浓度，在相同的条件下重复上述操作。 |
2楼2009-10-09 21:42:49
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荧光量子产率一般采用参比法测定。即在相同激发条件下，分别测定待测荧光试样和已知量子产率的参比荧光标准物质两种稀溶液的积分荧光强度（即校正荧光光谱所包括的面积）以及对一相同激发波长的入射光（紫外-可见光）的吸光度，再将这些值分别代入特定公式进行计算，就可获得待测荧光试样的量子产率： Yu = Ys · · Yu、Ys —待测物质和参比标准物质的荧光量子产率； Fu、Fs —为待测物质和参比物质的积分荧光强度； Au、As —为待测物质和参比物质在该激发波长的入射光的吸光度（A=εbc）。 运用此公式时一般要求吸光度As、Au低于0.05。参比标准样最好选择其激发波长值相近的荧光物质。有分析应用价值的荧光化合物的Yu一般常在0.1-1之间。 1、移取所需浓度的二氯荧光素与罗丹明B溶液，用相应溶剂稀释至10.0 mL（A505nm<0.05），在紫外－可见分光光度计上测定其吸收光谱曲线；分别测定它们在505 nm处的吸光度。 2、移取上述相同的溶液于荧光比色皿中，在荧光仪上分别扫描其荧光激发光谱及发射光谱；分别测定它们以505 nm为激发波长时的荧光发射光谱 |
3楼2009-10-09 22:09:06
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