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细胞冻存保种要注意哪些？
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1.密切观察细胞的生长密度，当细胞密度即将达到其生长密度极限时进行换液，以便第二天进行保种； 2.消化前进行冻存液配制，切勿用培养基和血清重悬细胞后再加入DMSO，这样会导致局部高浓度的DMSO对细胞产生损伤； 3.消化前预估细胞的数量，加入适量冻存液，以使细胞密度为1-2*10E6/ml，密度过高会导致冻存保护液不足，密度过低会导致冻存液对细胞有毒性； 4.梯度降温盒必须提前复温至室温，切勿从-80℃取出即可使用，这样会导致细胞全部死亡； 5.离心速度和时间依据具体细胞决定。 |
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