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lialunxi

新虫 (小有名气)

[求助] b-actin CT值 已有1人参与

请问虫友们,第一次用b-actin跑pcr,肠癌细胞的模型,CT值多少合适呢,我跑出来是23.比GAPDH大多了。具体逆转录过程,选择的是1ug RNA。在qRCR阶段,把cDNA 1:10稀释,选择2ul开始做qPCR.
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闪烁其词

新虫 (初入文坛)

HepG2 cDNA稀释8倍在16左右

发自小木虫IOS客户端
2楼2023-09-23 10:00:26
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

qPCR中内参基因Ct与引物扩增效率(引物设计位点及PCR产物长度)、使用体系(试剂盒及反应体系)等因素都有关系,确保实验组和对照组内参Ct相差不大即可,如果实在担心ACTB的Ct值偏好,重新设计个印务试试看能否解决你心中的疑惑。
坚持到底就是胜利!
3楼2023-09-28 08:12:52
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

打字太快,存在错别字,不好意思哦!纠正:“偏好”~“偏高”;“印务”~“引物”。
坚持到底就是胜利!
4楼2023-09-28 08:15:05
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