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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » b-actin CT值
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【悬赏金币】回答本帖问题，作者lialunxi将赠送您 5 个金币

lialunxi

新虫 (小有名气)

[求助] b-actin CT值 已有1人参与

请问虫友们，第一次用b-actin跑pcr，肠癌细胞的模型，CT值多少合适呢，我跑出来是23.比GAPDH大多了。具体逆转录过程，选择的是1ug RNA。在qRCR阶段，把cDNA 1:10稀释，选择2ul开始做qPCR.
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1楼 2023-09-14 12:53:44
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闪烁其词

新虫 (初入文坛)
HepG2 cDNA稀释8倍在16左右

发自小木虫IOS客户端
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2楼2023-09-23 10:00:26
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

qPCR中内参基因Ct与引物扩增效率（引物设计位点及PCR产物长度）、使用体系（试剂盒及反应体系）等因素都有关系，确保实验组和对照组内参Ct相差不大即可，如果实在担心ACTB的Ct值偏好，重新设计个印务试试看能否解决你心中的疑惑。
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坚持到底就是胜利！
3楼2023-09-28 08:12:52
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
打字太快，存在错别字，不好意思哦！纠正：“偏好”~“偏高”；“印务”~“引物”。
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坚持到底就是胜利！
4楼2023-09-28 08:15:05
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