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蛋白 Marker遇到的问题 ？
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一、marker一定要都跑出来吗？ 比如说说明书上市7条带，其实跑出6条带是正常的,可能是跑的时间不够,如果你的蛋白不是很小的话,可以等溴酚蓝前沿刚跑出胶的时候再关电泳仪,这样应该可以有7条带.有的时候还会跑出5条,不过只要在你的目的蛋白的上下两个带都跑出来了就可以了,不一定非要7条。 二、marker变成笑脸状怎么办？ 第一，胶没有压片 第二胶在板的边缘与中心的胶的流动性可能不同，这个没有办法，跟黏度和表面张力有关。如果各种方法都不能解决上面的现象，个人建议maker换一条道上样，选一条靠近中间的泳道跑一跑。 边缘效应，在边缘两个泳道的样品会这样的。可以试试电泳速度慢点儿...... 要么配胶时没压好，胶没配好，要么电泳时电压太大，电渗力强，要么玻板电泳时没夹好，内电泳液是漏的，请逐一排查。 三、marker条带变宽怎么解决？ 原因一：上样量过多，应该减少上样量。 对策：加样体积根据样品浓度和凝胶厚度灵活掌握。一般上样体积为10-15μL（即2-10μg蛋白质）。如果样品很稀上样量可以达到100μL。 原因二：样品溶解不完全。 对策：(1)样品应该充分溶解：保持各种蛋白质样品和Marker在上样前能够充分溶解，上样前最好离心一下，实在溶解不掉的颗粒就去掉。 |
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