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肿瘤细胞侵袭实验的注意事项
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1、肿瘤细胞最好经过饥饿处理,并且小室上下培养基的FBS有浓度差,以保证细胞可以穿透基质胶。 2、铺细胞要均匀,滤膜底部不能产生气泡,否则会导致细胞染色不均匀,或者局部细胞无法穿透。 3、侵袭实验的细胞密度比较大,不同肿瘤细胞的接种密度、培养时间不同,需要实验摸索。细胞太少,迁移不过去;细胞太多,可能导致正常组和实验组无差异。 4、首次做实验需要用正常的细胞摸索合适的细胞密度和培养时间,确定之后再加实验组,同时如果条件允许,设置一组已知高迁移性的细胞作阳性对照。 5、注意细胞小室内外培养基的比例,不要使小室外培养基超过小室内培养基液面。 6、观察细胞时一定要擦去小室内部贴在膜上的细胞。 |
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