| 查看: 1066 | 回复: 0 | |||
[交流]
细胞骨架染色神器——鬼笔环肽!
|
|
鬼笔环肽（又称鬼笔鹅膏素）是从毒蕈类鬼笔鹅膏中得到的有毒环状七肽，能选择性的与动植物体内的肌动蛋白结合，其作用与细胞松弛素Ｂ恰好相反，只与聚合的微丝结合，而不与肌动蛋白单体分子结合，使鬼笔环肽染色成为研究细胞内肌动蛋白微丝的有力工具，是细胞骨架的染色神器。光学显微镜下, 荧光标记过的鬼笔环肽可以清晰地显示出细胞内微丝的形态和分布，已广泛应用于生物医学研究中。 染色 · 步骤 此处以MG-63细胞爬片为例简述鬼笔环肽染色步骤： 将MG-63细胞接种在放置玻片的培养基中，37℃、5%CO2恒温培养箱中进行培养； 细胞培养至80-90%满时，用37℃预热的1×PBS（pH 7.4）清洗细胞2次； 使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定，室温固定10min； 室温条件下，用PBS清洗细胞2~3次，每次10min； 室温条件下，用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min； 室温条件下，用PBS清洗细胞2~3次，每次10min； 取200µL配制好的罗丹明标记鬼笔环肽工作液，覆盖住盖玻片上的细胞，室温避光孵育30min； 用PBS清洗盖玻片3次，每次5min； 使用200µL DAPI溶液（浓度：100 nM）对细胞核进行复染，约30s； 共聚焦显微镜或荧光显微镜下观察采集图像。 |
回复此楼» 猜你喜欢
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有289人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
