| 查看: 828 | 回复: 0 | |||
[交流]
细胞骨架染色神器——鬼笔环肽!
|
|
鬼笔环肽(又称鬼笔鹅膏素)是从毒蕈类鬼笔鹅膏中得到的有毒环状七肽,能选择性的与动植物体内的肌动蛋白结合,其作用与细胞松弛素B恰好相反,只与聚合的微丝结合,而不与肌动蛋白单体分子结合,使鬼笔环肽染色成为研究细胞内肌动蛋白微丝的有力工具,是细胞骨架的染色神器。光学显微镜下, 荧光标记过的鬼笔环肽可以清晰地显示出细胞内微丝的形态和分布,已广泛应用于生物医学研究中。 染色 · 步骤 此处以MG-63细胞爬片为例简述鬼笔环肽染色步骤: 将MG-63细胞接种在放置玻片的培养基中,37℃、5%CO2恒温培养箱中进行培养; 细胞培养至80-90%满时,用37℃预热的1×PBS(pH 7.4)清洗细胞2次; 使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定10min; 室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min; 室温条件下,用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min; 室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min; 取200µL配制好的罗丹明标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育30min; 用PBS清洗盖玻片3次,每次5min; 使用200µL DAPI溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约30s; 共聚焦显微镜或荧光显微镜下观察采集图像。 |
» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有109人回复
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物,制药工程,食品专业的调剂生
已经有0人回复
化工申博
已经有3人回复
申博自荐
已经有2人回复
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕,材料化工专硕调剂名额充足!
已经有0人回复













回复此楼