| 查看: 466 | 回复: 0 | |||
[交流]
细胞骨架染色神器——鬼笔环肽!
|
|
鬼笔环肽（又称鬼笔鹅膏素）是从毒蕈类鬼笔鹅膏中得到的有毒环状七肽，能选择性的与动植物体内的肌动蛋白结合，其作用与细胞松弛素Ｂ恰好相反，只与聚合的微丝结合，而不与肌动蛋白单体分子结合，使鬼笔环肽染色成为研究细胞内肌动蛋白微丝的有力工具，是细胞骨架的染色神器。光学显微镜下, 荧光标记过的鬼笔环肽可以清晰地显示出细胞内微丝的形态和分布，已广泛应用于生物医学研究中。 染色 · 步骤 此处以MG-63细胞爬片为例简述鬼笔环肽染色步骤： 将MG-63细胞接种在放置玻片的培养基中，37℃、5%CO2恒温培养箱中进行培养； 细胞培养至80-90%满时，用37℃预热的1×PBS（pH 7.4）清洗细胞2次； 使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定，室温固定10min； 室温条件下，用PBS清洗细胞2~3次，每次10min； 室温条件下，用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min； 室温条件下，用PBS清洗细胞2~3次，每次10min； 取200µL配制好的罗丹明标记鬼笔环肽工作液，覆盖住盖玻片上的细胞，室温避光孵育30min； 用PBS清洗盖玻片3次，每次5min； 使用200µL DAPI溶液（浓度：100 nM）对细胞核进行复染，约30s； 共聚焦显微镜或荧光显微镜下观察采集图像。 |
回复此楼» 猜你喜欢
关于举办2024年化工制药与材料类优秀大学生暑期夏令营的通知
已经有0人回复
-
M9培养基浑浊
已经有1人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有227人回复
-
面上评审意见-帮忙看一下等级（没上会）
已经有81人回复
-
目的基因序列中有多个引物插入
已经有1人回复
-
链霉亲和素磁珠偶联biotin修饰分子好还是点击反应偶联分子好？
已经有0人回复
-
磁珠法纯化蛋白相比层析柱有什么优势？
已经有3人回复
-
磁固相萃取在药物分析中有潜在应用价值吗？
已经有0人回复
-
关于为什么要在生物传感形成图案的原因求助
已经有0人回复
-
华东理工大学化工学院胡静课题组招博士生和博士后。欢迎有志科研青年加入！
已经有0人回复
-
申博申博
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
20