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【求助】请问有用凝胶电泳分离生物碱的吗？
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如题，请高手指教 [ Last edited by chzhbin on 2009-10-9 at 21:39 ] |
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生物碱的分离和纯化 一种植物中往往含有几种或几十种生物碱。 因此，提取出来的总生物碱还需进一步分离，去除杂质、排除干扰物，保证分析结果的准确性。 1 一般纯化的方法可析出结晶的生物碱用重结晶法；挥发性生物碱可用水蒸气蒸馏法；易升华的生物碱用升华法提取得到单体。由不同沸点组成的液体生物碱总碱，往往可通过常压或减压分馏分离。如毒芹中的毒芹碱和羟基毒芹碱，石榴皮中的伪石榴皮碱、异石榴皮碱和甲基异石榴皮碱等都可通过减压分馏法分离出来［3］。许多生物碱的盐比游离碱更易于结晶。因此，可利用其在各种溶剂中的不同溶解度进行分离，之后再转变成游离碱［3］。 2 色谱法色谱法利用混合物组分在固定相中吸附和分配系数的微小差别，达到各组分彼此分离的目的。优点是分离效率高，它能把各种性质极相似的组分彼此分离，而后分别加以测定，因而是一类重要而常用且发展最快的分离手段，且对于那些用传统的分离方法难以分离的物质以及热敏性物质，该方法具有明显的优越性。对苷类生物碱或极性较大的生物碱，可用反相色谱或葡聚糖凝胶进行分离［13，14］。 对于PKα较大的生物碱，一般多用离子对色谱，通过离子对试剂和生物碱形成中性络合物达到分离的目的［3］。 3 树脂吸附分离技术 树脂吸附是一种有效分离有效成分的途径。大孔吸附树脂是20世纪60年代末发展起来的一类有机高聚物吸附剂，它具有多孔网状结构和较好的吸附性能。在对某些中药材或者中药复方制剂中的有效成分进行定性、定量检测时，使用大孔吸附树脂可有效的除去某些干扰成分，而取得较好的效果［15］。 用大孔吸附树脂提取中草药有效成分优势显著，提取苦豆子生物碱具有吸附快、解吸易、流体流动性能好,树脂寿命长,对环境、产品无污染等独特优势,有利于规模化生产。 4 超滤法 超滤法是20世纪60～70 年代发展起来的一种以多孔性半透膜——超滤膜作为分离介质的膜分离技术。具有分离不同分子量分子的功能。超滤法优点在于不耗任何溶剂，操作简单。虽然总生物碱纯度较低，但超滤液可以直接结合阴离子交换树脂进一步对生物碱进行进一步纯化，减少了纯化过程中的许多中间步骤，且总生物碱的纯度高，树脂的污染小。彭国平等［16］研究各材质超滤膜对不同中药成分的影响，结果表明生物碱类成分对膜超滤有较强的选择性，可适用于水溶性较大成分的分离。 5 超临界萃取技术基于超临界流体的优良特性发展起来的超临界流体萃取（SFE）技术被列为中药药效最佳提取分离技术，兼有精馏和液-液萃取的特点，操作参数易于控制，溶剂可循环使用，特别适合于分离热敏性物质。虽然SFE技术也存在缺乏对超临界流体状态本身的透彻理解，高压设备目前较昂贵，商业利益促使的专利保护等因素制约着该技术的发展等，但超临界萃取技术仍是一种符合当代绿色潮流的洁净、高效提取技术。已报道采用SFE技术萃取秋水仙根和光菇子（秋水仙碱）、益母草、荜茇（胡椒碱）等生物碱 |
4楼2009-10-09 18:09:16
