| 查看: 231 | 回复: 0 | ||||
Sh毕合生物
|
[交流]
血清的保存方式
|
|
血清的保存应该注意以下几点： （1）生物学实验中需要长期保存的血清储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，预留体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。 （2）热灭活是指56℃，30分钟加热已解冻的血清。生物学实验中加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分（complement）灭活。除非，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用，平滑肌细胞收缩，肥大细胞和血小板释放组胺，增强吞噬作用，促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。 （3）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。生物学实验中在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。 （4）一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。 （5）血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm， 5分钟去除，也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察像"小黑点"，常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。 （6）切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。 作者：毕合生物公众号：毕合生物毕合生物（http://www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 血清的保存应该注意以下几点： （1）生物学实验中需要长期保存的血清储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，预留体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。 （2）热灭活是指56℃，30分钟加热已解冻的血清。生物学实验中加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分（complement）灭活。除非，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用，平滑肌细胞收缩，肥大细胞和血小板释放组胺，增强吞噬作用，促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。 （3）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。生物学实验中在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。 （4）一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。 （5）血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm， 5分钟去除，也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察像"小黑点"，常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。 （6）切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。 作者：毕合生物 公众号：毕合生物 毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
回复此楼» 收录本帖的淘贴专辑推荐
 细胞实验集锦 |
» 猜你喜欢
女博士高校择业三天之内签合同，求支招
已经有33人回复
-
优秀毕业论文 指导教师，普通老师有希望吗？
已经有10人回复
-
共同通讯谁投稿？
已经有6人回复
-
答辩
已经有8人回复
-
审不上青基又非升即走的青椒 和 牢里踩缝纫机的犯人哪个活的更舒服一点？
已经有22人回复
-
山东省基金：作为项目负责人承担面上项目数量累计不得超过2项
已经有8人回复
-
基金评审
已经有5人回复
-
大扩招
已经有19人回复
-
转发，”朋友说招呼都定点打到他那里了＂
已经有14人回复
-
又见奇葩学生，可咋办
已经有31人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
20
