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抑菌圈试验操作步骤及注意事项
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试验过程 1、用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中，用手振荡数分钟使孢子分散，过滤后制成混合孢子悬液。 2、用无菌吸管（或针筒）向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。 3、向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基（约45℃），将菌液与培养基混合均匀，待其冷却。 4、用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻，取出置于带菌培养基平板的中央，盖上盖子 5、置适宜温度下，培养2~3d，观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。 注意事项 1、所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理，操作必须在无菌室（或无菌箱）内于火焰旁进行。 2、霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液，即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液，并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。 3、混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL. 4、倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高（一般为45℃左右），否则会引起微生物死亡。也不能太低，因为琼脂会很快凝结，以致搅拌不均匀，影响试验结果。 5、各种微生物的最适生长温度不同（例如霉菌一般为25~30℃，细菌一般为32~37℃等），恒温培养时宜分开放置。 |
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