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科研小努力

新虫 (小有名气)

[交流] 抑菌圈试验操作步骤及注意事项

试验过程

1、用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。

2、用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。

3、向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均匀,待其冷却。

4、用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央,盖上盖子

5、置适宜温度下,培养2~3d,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。



注意事项
1、所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理,操作必须在无菌室(或无菌箱)内于火焰旁进行。

2、霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液,即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液,并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。

3、混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.

4、倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高(一般为45℃左右),否则会引起微生物死亡。也不能太低,因为琼脂会很快凝结,以致搅拌不均匀,影响试验结果。

5、各种微生物的最适生长温度不同(例如霉菌一般为25~30℃,细菌一般为32~37℃等),恒温培养时宜分开放置。
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