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wcs0313木虫 (正式写手)
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【求助】 如何使用聚酰胺柱
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| 听说聚酰胺对黄酮类的分离效果很好，但是没用过，希望高手能指点一下，万分感谢！ |
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wuliang6898
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2楼2009-10-08 18:52:41
jinlin
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黄酮类化合物的提取分离
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 10-8 19:06
ynmyx(金币+2,VIP+0):谢谢您的回帖，鼓励积极参与交流！！ 10-8 19:07
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黄酮类化合物的提取分离 一、提取 黄酮苷和极性较大的苷元：甲醇，乙醇，甲醇-水（1：1），丙酮，乙酸乙酯。 多糖苷：沸水 花色苷：0.1%盐酸进行提取。 苷元：氯仿，乙醚，乙酸乙酯。 注意：苷类提取防止酶解。 （一）溶剂萃取法：自浸膏中先用乙醚萃取苷元，再用乙酸乙酯反复萃取苷，最后用正丁醇萃取极性较大的苷。 （二）碱提酸沉法 (1) 常用碱水：石灰水，Na2CO3，稀NaOH，碱性稀醇。 酸沉：盐酸 注意：酸碱浓度不宜过高。 碱性过强，破坏黄酮母核；酸性过强，生成佯盐，影响产率。 石灰水：可除去鞣质，果胶，粘液质，有利于纯化。但浸出效果不及NaOH ，且有些黄酮可与钙结合成不溶性沉淀。 稀NaOH：浸出效率高，但杂质多。 二、分离方法 分离的基本依据： 极性差异、酸性强弱、分子大小和特殊结构。 （一）柱色谱法 1、硅胶柱色谱法 适于分离异黄酮，二氢黄酮（醇）和高度甲基化或乙酰化的黄酮及黄酮醇类。 分离苷元时：氯仿-甲醇混合溶剂洗脱。 分离苷时：氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水 2、聚酰胺柱色谱 适于黄酮类化合物的分离。 规律： A：苷元相同时，以含水移动相洗脱，被吸附的强弱顺序为： 苷元>单糖苷>双糖苷>双糖键苷。 B：与酚羟基的数目有关，数目越多，吸附力越强。与酚羟基的位置有关，如果酚羟基所处的位置易形成分子内氢键，则吸附力减弱。 查耳酮>二氢黄酮， 黄酮>二氢黄酮 C：不同类型黄酮类化合物，被吸附的强弱顺序为：黄酮醇>黄酮>二氢黄酮>异黄酮。 D：分子内芳香化程度越高，共轭双键越多，则吸附力越强。 3、葡聚糖凝胶色谱法 凝胶类型：Ssephadex LH-20和Sephadex G两种类型的凝胶。 分离苷元时：利用吸附作用，游离酚羟基数目越多，则吸附力越强，越难洗脱。 分离苷时：主要靠分子筛，洗脱时按苷分子量由大到小的顺序依次被洗脱出柱体。 黄酮类化合物 取代基 Ve/Vo 芹菜素 5，7，4‘-三羟基 5.3 木犀草素 5，7，3‘，4’-四羟基 6.3 槲皮素 3，5，7，3'，4'-五羟基 8.3 杨梅素 3，5，7，3‘，4’，5‘-六羟基 9.2 山柰酚-3-鼠李糖基 三糖苷 3.3 半乳糖-7-鼠李糖苷 槲皮素-3-芸香糖苷 双糖苷 4.0 槲皮素-3-鼠李糖苷 单糖苷 4.9 常用的洗脱剂：碱性水溶液，含盐水溶液、醇及含水醇 （二）PH梯度法：用不同浓度的碱分离 （三）硼酸络合法 具有邻二酚羟基的黄酮类化合物可与硼酸络合生成易溶于 水的化合物。 |
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tianxue.1202
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