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实验技巧 | 细胞培养重难点,解疑惑
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问：细胞体内外培养的差别是什么？ 答：细胞离体后，失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响，生活在缺乏动态平衡相对稳定环境中，日久天长，易发生如下变化：分化现象减弱；形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡；或发生转化获得不死性，变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此，培养中的细胞可视为一种在特定的条件下的细胞群体，它们既保持着与体内细胞相同的基本结构和功能，也有一些不同于体内细胞的性状。实际上从细胞一旦被置于体外培养后，这种差异就开始发生了。 问：什么是无血清培养基？与普通培养基有什么区别？ 答：无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。添加组分可能包括纤连蛋白、层粘连蛋白等贴壁因子、胰岛素、转铁蛋白、硒等。 问：细胞培养基偶然被冻，可否继续使用？ 答：如果细胞培养基偶然被冻，您应该自然溶解培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生，培养基可以正常使用，如果出现沉淀，只能丢弃这些培养基。 问：培养基及其它添加物和试剂可反复冻融吗？ 答：大部分添加物和试剂最多可以冻融3次，如果次数过多会将使含有的蛋发生降解和沉淀，这将会影响它的性能。 问：液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？ 答：要冷藏！！通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月到一年。 问:低血清培养基能用肉眼判断其pH值吗？ 答：低血清培养基中酚红的含量与普通培养基中的酚红含量不同，不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值，建议使用pH计进行测定。 |
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