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jingjingkitten

铜虫 (小有名气)

[求助] 内标法定量分析时,内标应该什么时候添加? 已有2人参与

各位虫友,在做定量分析时遇到一个问题,内标物应该时候加入比较合适?参考的国标方法中,样品在酶解之后添加10ng内标,然后经过液液提取,SPE柱等步骤,但标准曲线的内标浓度为5ng/mL,是逐级稀释添加的,不经过上述前处理过程,请问这样的话曲线应该怎么计算?因为内标物添加量不同,还涉及到了提取的过程,感觉很困惑,请教大家,急盼回复!
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真实坦然
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

测定前添加,只是为了定量分析而已。不考虑提取过程
2楼2023-08-03 09:35:56
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jiazi45

木虫 (小有名气)

质谱小白

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品中内标添加量,根据自己定容体积计算加标浓度,该浓度与系列标准溶液内标浓度一致。
如上,样品处理前加入内标物10ng,最终定容2mL,则内标浓度理论值为5ng/mL;
在配制系列标液时,定容前在每个浓度点加入相应的等量内标物,理论值同样为5ng/mL。
这样在最终建立校正曲线时,才能保证样品与标液浓度是一致的。
质谱检测工具-小程序-分子量计算器
3楼2023-08-03 13:19:00
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chjm1016

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品消解后就加时为了校准样品萃取浓缩这些过程的损失,能更接近样品的真实值。标准曲线应该是(目标物信号/内标物信号)VS目标物浓度,再根据样品中目标物信号/内标物信号推算出样品含量。如果样品中内标物的浓度和标线中的不同,还需要一个校正系数,但是一般考虑使用相同的浓度。
4楼2023-08-04 12:30:32
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