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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 质谱分析 » 内标法定量分析时，内标应该什么时候添加？
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jingjingkitten

铜虫 (小有名气)

[求助] 内标法定量分析时，内标应该什么时候添加？ 已有2人参与

各位虫友，在做定量分析时遇到一个问题，内标物应该时候加入比较合适?参考的国标方法中，样品在酶解之后添加10ng内标，然后经过液液提取，SPE柱等步骤，但标准曲线的内标浓度为5ng/mL，是逐级稀释添加的，不经过上述前处理过程，请问这样的话曲线应该怎么计算？因为内标物添加量不同，还涉及到了提取的过程，感觉很困惑，请教大家，急盼回复！
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真实坦然
1楼 2023-08-02 22:09:36
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柳絮虫

新虫 (职业作家)
测定前添加，只是为了定量分析而已。不考虑提取过程
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2楼2023-08-03 09:35:56
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jiazi45

木虫 (小有名气)

质谱小白

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品中内标添加量，根据自己定容体积计算加标浓度，该浓度与系列标准溶液内标浓度一致。
如上，样品处理前加入内标物10ng，最终定容2mL，则内标浓度理论值为5ng/mL；
在配制系列标液时，定容前在每个浓度点加入相应的等量内标物，理论值同样为5ng/mL。
这样在最终建立校正曲线时，才能保证样品与标液浓度是一致的。
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质谱检测工具-小程序-分子量计算器
3楼2023-08-03 13:19:00
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chjm1016

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品消解后就加时为了校准样品萃取浓缩这些过程的损失，能更接近样品的真实值。标准曲线应该是（目标物信号/内标物信号）VS目标物浓度，再根据样品中目标物信号/内标物信号推算出样品含量。如果样品中内标物的浓度和标线中的不同，还需要一个校正系数，但是一般考虑使用相同的浓度。
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4楼2023-08-04 12:30:32
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