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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 超滤浓缩后蛋白解聚原因
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sssssszl

新虫 (初入文坛)

[求助] 超滤浓缩后蛋白解聚原因 已有1人参与

用sf9表达的，我的蛋白三聚体有活性，带his标签，高浓度咪唑洗脱后用超滤管浓缩，把buffer置换成pbs。wb，非还原loading洗脱后是三聚体，超滤浓缩后全都变成了单体，已经重复两次了一天内做完的，不是放久了解聚

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1楼 2023-08-01 21:39:11
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果浓缩，蛋白浓度变高，平衡应倾向于形成多聚体，浓缩是解聚的原因不大。

有没有可能是pH值的改变，高浓度的咪唑的pH值，可能和你PBS的pH值不一样。   含高浓度咪唑溶液浓缩后，未换PBS之前，发生解聚了么？
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2023-08-02 09:08:59
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