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sssssszl

新虫 (初入文坛)

[求助] 超滤浓缩后蛋白解聚原因 已有1人参与

用sf9表达的,我的蛋白三聚体有活性,带his标签,高浓度咪唑洗脱后用超滤管浓缩,把buffer置换成pbs。wb,非还原loading洗脱后是三聚体,超滤浓缩后全都变成了单体,已经重复两次了一天内做完的,不是放久了解聚

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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果浓缩,蛋白浓度变高,平衡应倾向于形成多聚体,浓缩是解聚的原因不大。

有没有可能是pH值的改变,高浓度的咪唑的pH值,可能和你PBS的pH值不一样。   含高浓度咪唑溶液浓缩后,未换PBS之前,发生解聚了么?
行至水穷处,坐看云起时
2楼2023-08-02 09:08:59
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