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学员RcwBEk

新虫 (初入文坛)

[求助] 自制nissle 1917感受态细胞无法转化含AMP抗性的质粒载体 已有2人参与

大肠杆菌nissle 1917制备感受态之后,始终转化不了含有目的基因的pBAD质粒载体,尝试过化学转化和电转,都长不出菌落,请问这是什么原因呢?有什么解决办法?
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John Ray

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议用EcNc不要用EcN,EcN本身有两个小质粒,影响转化。转质粒时要适当提高浓度和孵育时间。另外我自己所用包括看的一些文献均是电转,并未提过化学转化。
3楼2023-08-16 09:39:03
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


2楼2023-08-02 10:38:58
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Martis

新虫 (初入文坛)

您好楼主,请问您的问题解决了吗?我也是EcN转化失败,但不知道原因
5楼2025-06-22 20:47:41
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