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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » Western Blot实验结果中无信号或显示信号弱？
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Western Blot实验结果中无信号或显示信号弱？
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◇ 检测样本不表达目的蛋白——选择表达量高的细胞作为阳性对照，用于确定检测样本是否为阴性。
◇ 检测样本低表达目的蛋白——提高上样量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制剂。
◇ 转移不完全或过转移——可以用丽春红染膜并结合染胶（考马斯亮蓝）后确定条带是否转至膜上或转移过头；适当调整转膜的时间和电流。
◇ 抗体不能识别测试种属的相关蛋白——购买抗体前应当认真阅读抗体说明书，确定其是否能够交叉识别测试种属的对应蛋白。
◇ 一抗孵育时间不足——建议4℃结合过夜。
◇ 二抗与一抗不匹配——选择针对一抗来源的种属的抗体。
◇ 洗膜过度——洗膜时间不宜过长，加入的去垢剂不宜过强或过多，建议使用0.1%的弱去垢剂Tween-20。

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1楼 2023-07-25 12:27:40
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tzynew2楼
2023-07-25 12:28   回复  
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必得奖学金3楼
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周潜修4楼
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chenhuanlong5楼
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XG-WUST6楼
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哈姆太郎7楼
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anita*8楼
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恒意赛teh9楼
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psh1989021910楼
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gy72962611楼
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gramoxone12楼
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y1987yuyu13楼
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深度学习er14楼
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nono200917楼
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MicroShop18楼
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bluesky999919楼
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bdfh21楼
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sfhajy22楼
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熊弻23楼
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jjf52124楼
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H2022020225楼
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士卡祺26楼
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云在青天27楼
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aaatancan28楼
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天天向上_up29楼
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?泥肽酶#30楼
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辣么香31楼
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