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[交流] 微生物实验室间歇灭菌方法

1.灭菌方法系:

  利用不加压力的蒸气灭菌,某些物质经高压蒸气灭菌容易破坏,可用此法灭菌。

  1.1 将欲灭菌物品置于锅内,盖上顶盖,打开排水口,使器内余水排尽。

  1.2 关闭排水口,打开进气门,根据需要消毒10~20min。

  1.3 灭菌完毕关闭进气门,取出物品待冷至室温温度,放入37℃温箱过夜,次日仍按上述方法消毒,如此三次,即可达到灭菌目的。

2.血清凝固器使用方法:

  培养基中含有血清或鸡蛋特殊成份时,因高热会破坏其营养成份,故用低温,可使血清凝固,又可达到灭菌目的:

  2.1 在使用该法灭菌的血清等分装时,需严格遵守无菌操作,试管、平皿也经灭菌后使用;

  2.2 将培养基按要求使成斜面或高层,加足水后,接上电源,升温75~90℃一小时后灭菌,放37℃温箱过夜,再如此灭菌三次。

3.煮沸消毒:

  可用煮锅或煮沸消毒器,水沸腾后再煮5~15 min,也可在水中加入2%石炭酸煮沸5min,加入0.02%甲醛,80℃煮60min均可达到灭菌目的,但选用煮沸消毒的增消剂时,应注意对物品的腐蚀性。

4.灭菌处理:

  灭菌后物品,按正常情况已属无菌,从灭菌器中取出应仔细检查放置,以免再度污染;

  4.1 物品取出,随即检查包装的完整性,若有破坏或棉塞脱掉,不可作为无菌物品使用;

  4.2 取出的物品,如为包装有明显的水浸者,不可作为无菌物品使用;

  4.3 培养基或试剂等,应检查是否符合达到灭菌后的色泽或状态,未达到者应废弃;

  4.4 启闭式容器,在取出时应将筛孔关闭;

  4.5 取出的物品掉落在地或误放不洁这处,或沾有水液,均视为受到污染,不可作为无菌物品使用;

  4.6 取出的合格灭菌物品,应存放于贮藏室或防尘柜内,严禁与未灭菌物品混放;

  4.7 凡属合格物品,应标有灭菌日期及有效期限;

  4.8 每批灭菌处理完成后,记录灭菌品名、数量、温度、时间、操作者。

作者:毕合生物
公众号:毕合生物
毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
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