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细胞划痕实验
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细胞划痕实验（Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。特点： 1，在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。2, 非常适合研究细胞与胞外基质（ECM），细胞与细胞之间相互作用引起的细胞 迁移。3，与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容，可用于分析细胞间的相互作用。4，研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。 传统实验方法 实验步骤：1，培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记（方便拍照时定位同一 个视野）。2，细胞消化后接入12孔板，数量以贴壁后铺满板底为宜（数量少时可培养一段时间至铺满板底）。3, 细胞铺满板底后，用1ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕，尽量保证各个划痕宽度一致。（人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性，影响实验结果，这也是该方法最大的缺陷。）4，吸去细胞培养液，用PBS冲洗孔板三次，洗去划痕产生的细胞碎片。5，加入无血清培养基，拍照记录。6，将培养板放入培养箱培养，每隔4-6小时取出拍照。7，根据收集图片数据分析实验结果。德国IBIDI（易必迪）公司Culture Insert方法 1，准备细胞，培养液，culture Insert。2，如图，将细胞接种于Dish中间的Insert，细胞长满Insert 区域后用镊子移除Insert即可产生500μm宽度的划痕。3，每隔4-6小时拍照记录。4，根据收集图片数据分析实验结果。 实验原理示意图 总结：相比较于传统的划痕实验，Ibidi的设计更科学、重现性更好。 作者：毕合生物 公众号：毕合生物 毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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