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page胶中，使胶跟玻璃板粘合和分离，两种试剂的配方？ 有的叫粘合剂和分离剂，有的叫剥离硅烷和亲和硅烷，反正我知道有那么两种配方，希望大家能帮帮我，我看到过配方的药品种类，但一时记不起浓度，希望那位大侠能帮我一下！（无以为报，谨以金币赠之） |
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铁杆木虫 (职业作家)
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测序胶？这里有份资料 （二）、 测序凝胶板的制备 1、玻璃板的处理： 银染测序的玻璃板一定要非常清洁，一般先用温水和去污剂洗涤，再用去离子水冲洗玻璃板，除去残留的去污剂，最后用乙醇清洗玻璃板。玻璃板上遗留的去污剂微膜可能导致凝胶染色时背景偏高(棕色)。短玻璃板经粘合溶液处理可将凝胶化学交联于玻璃板上。这一步对于在银染操作过程中防止凝胶撕裂至关重要。 （1）短玻璃板的处理 A. 在1ml 95%乙醇, 0.5%冰乙酸中加入5ml粘合硅烷(Bind Silane), 配成新鲜的粘合溶液。 B. 用经浸透新配的粘合溶液浸透的吸水棉纸擦拭仔细清洗过并已经自然干燥的玻璃板, 整个板面都必须擦拭。 C. 4-5分钟后, 用95%乙醇单向擦玻璃板, 然后略用力沿垂直方向擦拭。重复三次这一清洗过程, 每次均须换用干净的纸, 除去多余的粘合溶液。 [注意] 1. 在95%乙醇单向擦玻璃板时过度用力会带走过多的粘合硅烷, 使凝胶不能很好地粘附。 2. 准备长玻璃板之前要更换手套，防止粘染粘合硅烷。 3、防止粘合溶液沾染在长玻璃板上是很重要的, 否则将导致凝胶撕裂。 (2)、长玻璃板的处理 A. 用浸透Sigmacote溶液的棉纸擦拭清洗过的长玻璃板。 B. 5-10分钟后用吸水棉纸擦拭玻璃板以除去多余的Sigmacote溶液。 [注意] 1. 用过的凝胶可在水中浸泡后用剃须刀片或塑料刮刀刮去。玻璃板须用去污剂完全清洗。或者凝胶用10% NaOH浸泡后除去。为防止交叉污染, 用于清洗短玻璃板的工具必须与清洗长玻璃板的工具分开, 如果出现交叉污染, 以后制备的凝胶可能撕裂或变得松弛。 2、凝胶的制备： （1）玻璃板经粘合硅胶和Sigmacote处理后，即可固定玻璃板 剥离硅烷、亲和硅烷用法 玻璃板洗尽后，用擦镜纸沾少许涂擦玻璃板即可。 亲和硅烷用法 玻璃板洗尽后，用擦镜纸沾少许涂擦玻璃板即可。 也可按1：250用蒸馏水稀释，浸泡玻璃板，在水 平摇床上振荡30秒即可（后者没有直接涂擦节省）。 注：两者均应用于聚丙烯电泳，剥离硅烷用于涂擦 小玻璃板，使凝胶不沾玻璃，亲和硅烷涂擦于大玻 璃板，使凝胶紧贴于玻璃板。 |
2楼2009-10-06 17:48:01
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
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