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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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snakeyang115

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC出现倒峰,求助

各位好,我在做液相,用的是荧光检测器,标准品进了后很正常,当进样品时标准品出峰位置会出现倒峰,空白在出峰位置也有倒峰,但随着样品中药物浓度的增加,峰会由倒峰变成正峰,以为是有气泡,又进了同样的样品,可是还是出现了倒峰,请问哪位可以为之解答一下,谢谢 我的流动相是磷酸二氢钾-甲醇60:40,样品是乙酸乙酯提取的

[ Last edited by jw227 on 2009-10-6 at 21:17 ]
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jinlin

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 10-6 22:46
472514568(金币+1,VIP+0):谢谢回帖! 11-29 12:43
根据我的经验,基本上是样品溶剂比流动相的UV吸收值低而产生的。比如流动相用n%甲醇,样品用水溶解,溶剂峰肯定为负峰,比n%比例小的溶剂也出现不同程度的负峰.机理为:样品和流动相的协同的吸着作用和竞争的吸着作用。
解决办法:
1.用纯试剂作流动相,用高质量的离子对试剂和缓冲物质配制流动相,各类试剂加合起来应产生最小的倒峰。
2.用流动相溶解样品。可减少到峰的出现几率。
3.进最小体积的样品溶液。一般小于20ul
4.预处理好样品,样品中的杂质会促成倒峰的出现。
5.以上方法仍不能解决问题,则将倒峰作为特殊的干扰峰来处理,即作为特殊的组分来处理。改变色谱条件,使倒峰的位置发生变化避开被干扰的峰。
3楼2009-10-06 19:43:07
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472514568

至尊木虫 (职业作家)

小木虫议政大臣兼协办大学士

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
ynmyx(金币+1,VIP+0):鼓励回帖交流!谢谢指教! 10-6 10:54
可能原因:
1进样时压力波动所致。
2样品溶剂比流动相的UV吸收值低
3.流动相有气泡,建议超声脱气.
4.样品溶剂与流动相有渗容作用,建议用流动相溶解样品.
5.样品中含有交多的无机盐的存在.(持可能性较大)
保持心灵的纯洁
2楼2009-10-06 09:56:22
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guohuiwek

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是用了回流后的流动相所致,或者流动相被污染了!
心中有屎则眼中有屎,心有花则眼中有花
4楼2009-10-06 19:53:46
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ccbright1016

金虫 (正式写手)

UV的吸收值较低
柱效低
5楼2009-10-12 18:25:39
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