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mengze_1992

新虫 (初入文坛)

[求助] 碱性(pH8/10)条件下色谱柱柱效下降快,塔板数一天降低1/3

选用waters 的CSH C18色谱柱进行有关物质的方法开发,盐相是20mM乙酸铵(pH8.0),偶尔开发会用到10.0.有机相甲醇/乙腈,柱温35℃。

色谱柱简介里面耐受范围是1-11,起始比例10%有机相。算是有几年开发检测经验的人,不会超出色谱柱使用的要求范围。

但是在开发和检测过程中,间隔一天的峰高从190万降低至140万,主峰拖尾因子从1.1至1.5,塔板数降低1/3,分离度从2.4左右降低到1.5。柱效降低后,将色谱柱反接,会有一定的回升,但是达不到初始效果。咨询过几个不同的waters工程师,均表示使用没有问题,不太会出现这种情况。我们也考察了冲洗色谱柱的条件,柱温30,流速0.6,水相/有机相过渡冲洗延长至4h,也未改善。

化合物是哌嗪接氮杂环的小分子化合物,碱性。考察了样品用稀释剂(10%甲醇)溶解后,直接加氨水,也未析出,推测应不是样品在柱头析出导致。现在很疑惑为什么会一直柱效下降,要做什么样的调查和改善?
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