| 查看: 641 | 回复: 0 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者手机用户将赠送您 5 个金币 | ||
[求助]
求问电转效率低下的原因，仅有10的4次方
|
||
|
感受态制备： 将冻存的TG1甘油菌在2 YT平板划线，挑取单菌落转50 mL 2 YT液体培养基，培养10 h后取2 mL转200 mL2 YT液体培养基，当OD到0.5时取出，冰浴30 min。一管100 mL分装至预冷灭菌的50 mL EP管中，之后全程冰上操作 4℃ 5000 rpm离心10 min，弃上清 加入预冷10%甘油30 mL，沿瓶壁缓慢加入，冰浴吸打重悬沉淀，静置20 min 4℃ 5000 rpm离心10 min，弃上清，加入预冷10%甘油30 mL，沿瓶壁缓慢加入，冰浴吸打重悬沉淀，静置15 min 4℃ 5000 rpm离心10 min，弃上清，加入预冷10%甘油30 mL，沿瓶壁缓慢加入，冰浴吸打重悬沉淀，静置10 min 4℃ 5000 rpm离心10 min，弃上清，加入1 mL预冷10%甘油吸打重悬。每管100 μL分装（EP灭菌，预冷）。 转移-80℃ 30 min。 电转操作： 电转杯以75%乙醇浸泡2 h，超净台与紫外灯平行，吹干，至于冰上预冷 在冰上放置感受态解冻，加入重组质粒2μL，即10 ng（一管纯化后5 mM Tris洗脱再稀释5倍，另一管使用ElectroLigase，未纯化），轻击管底混匀，冰浴6 min 将感受态与质粒混合溶液加入电转杯中，敲击去气泡，并擦干 放入电转仪进行电转 迅速加入37℃ 900 μL SOC培养基于电转杯中，吸打混匀后转移至灭菌的EP管，200 rpm，37℃复苏2 h 图片是其中一个组原液涂布  平板.jpg@天使托 |
回复此楼» 猜你喜欢
0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学
已经有3人回复
-
085600材料与化工 求调剂
已经有8人回复
-
304求调剂
已经有7人回复
-
材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295
已经有8人回复
-
308求调剂
已经有5人回复
-
求调剂（材料与化工327）
已经有4人回复
-
泣血叩求调剂恩，愿以丹心报师恩
已经有6人回复
-
085600调剂
已经有5人回复
-
材料工程调剂
已经有9人回复
-
求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大
已经有4人回复
5