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免提取DNA直扩方法与应用心得 ----兼容SNP荧光终点法（Flu-ARMS或KASP），电泳PCR
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高通量提取DNA做PCR，SSR，SNP检测如Flu-ARMS或KASP动辄上千个样品，用柱子提取花费太高，离心耗时太多，通量上不去。磁珠法需要配合自动提取仪，对设备要求高。目前绝大部分实验室还是使用传统的CTAB法或者其相关简化版方法，只要用普通化学试剂，成本便宜，但需要酒精沉淀，烘干，操作还是略微需要一定时间。提DNA是必须的吗？ 固德生物推出免提取DNA直扩方法和直扩裂解试剂，不用任何提取步骤，只需： 1. 取 2cm长水稻叶片，在 96深孔板里，加 5mm钢珠一颗，加 400ul直扩裂解液； 2. 高通量研磨机 1400rpmX40S； 3. 吸取 10ul研磨液体至 90ul水中，混匀，直接上机（DNA在体系中加量常在 20%~50%， 推荐为 50%）。 以上步骤10分钟内就可以完成96*2份样本处理。一天可以处理上近万份样本，高效快捷。 无需提取DNA，从取样到PCR结束，只需要一个小时， PCR结束无论是看SNP荧光分析还是SSR电泳跑胶都适用 试剂不含强碱裂解液，比碱煮法更柔和，通用性更强。 轻松完成水稻、玉米、小麦、拟南芥，农杆菌，培养细胞，血液等样本的大规模DNA提取 案例： PCR+荧光做SNP检测：水稻叶片用直扩裂解液研磨后上清稀释15倍，配合固德生物Flu-ArmsTM SNP分子标记检测试剂，PCR后荧光扫描进行基因分型 （此方法用普通PCR+荧光定量或扫描仪大规模做SNP分析，通量高，操作简单） PCR+电泳做SNP检测：油菜叶片用直扩裂解液研磨后上清稀释15倍，配合固德生物PG-ArmsTM SNP分子标记检测试剂，PCR后做8%PAGE电泳进行基因分型。（此方法用普通PCR+电泳设备就能大规模做SNP分析，不需要荧光定量PCR仪。适合SSR转SNP方法。转型简单，成本底） PCR+电泳做片段检测：油菜叶片用直扩裂解液研磨后上清稀释10倍，PCR后做琼脂糖电泳 |
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