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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 除多糖
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木子米米

金虫 (小有名气)

[交流] 除多糖

真菌发酵液里的多糖怎么出去？
看到有说用无水乙醇可以沉淀除去，但是我加了一倍跟两倍体积的无水乙醇，振荡了一个晚上，也没有沉淀，请问是怎么回事呢？
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1楼2009-10-04 09:37:23
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HarveyWang

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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
木子米米(金币+1,VIP+0): 10-4 11:32
amisking(金币+6,VIP+0): 10-4 15:46
引用回帖:
Originally posted by 木子米米 at 2009-10-4 09:37:
真菌发酵液里的多糖怎么出去？
看到有说用无水乙醇可以沉淀除去，但是我加了一倍跟两倍体积的无水乙醇，振荡了一个晚上，也没有沉淀，请问是怎么回事呢？

楼主，乙醇最终浓度一般要达到70-90%啊！

（1） 首先要把你课题的背景讲清楚，别人才能帮到你！
你是想到得到多糖？还是想得到发酵液中的其他目的物质？


（2）想得到多糖，就按下面的方法原则去查资料，优化工艺。

有机溶剂分步沉淀法是根据不同多糖在不同浓度低级醇、酮中具有不同溶解度的性质，从小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮进行分步沉淀。在多糖溶液中加入不同浓度乙醇溶液，得到多个多糖；天门冬冷水浸提物采用丙酮分级沉淀法得到3种多糖。


盐析法是根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同而将其分离的一种方法。常用的盐析剂有氯化钠、氯化钾、硫酸铵等，以硫酸铵最佳。

金属络合物法是利用多糖能与铜、钡、钙、铅离子形成络合物而沉淀。常用的络合剂有斐林试剂、氯化铜、氢氧化钡和醋酸铅等。

季胺氢氧化物是一类乳化剂，与酸性多糖形成不溶性化合物，常用于分离酸性多糖。一般地说，酸性强或相对分子质量大的多糖首先沉淀出来，所以控制季胺盐的浓度能分离各种不同的酸性多糖。

（3）
如果是想得到发酵液中的其他物质，
建议研究重点放在目的物质的纯化上，
去除多糖许多时候要比纯化目的物质更麻烦！

[ Last edited by HarveyWang on 2009-10-4 at 10:15 ]
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-10-04 10:14:12
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木子米米

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-10-4 10:14:


楼主，乙醇最终浓度一般要达到70-90%啊！

（1） 首先要把你课题的背景讲清楚，别人才能帮到你！
你是想到得到多糖？还是想得到发酵液中的其他目的物质？
...

我需要测定发酵液中是否含有生物碱，用的是生物碱沉淀剂，但是多糖会干扰生物碱沉淀剂的检测，所以要把多糖除去之后才能检测。

[ Last edited by 木子米米 on 2009-10-4 at 11:38 ]
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3楼2009-10-04 11:34:48
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HarveyWang

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海外行者
引用回帖:
Originally posted by 木子米米 at 2009-10-4 11:34:

我需要测定发酵液中是否含有生物碱，用的是生物碱沉淀剂，但是多糖会干扰生物碱沉淀剂的检测，所以要把多糖除去之后才能检测。

[ Last edited by 木子米米 on 2009-10-4 at 11:38 ]

哎，问题在于你是测定什么分子？
有许多其他方法可以很方便的分离生物碱类，而不必考虑多糖的干扰啊！

例如，TLC方法方便，根本不用考虑多糖的干扰。

不如你的问题改成：
测定XXX发酵液中A生物碱的 TLC 或 HPLC 方法。

这才是问题所在。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-10-4 at 11:58 ]
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4楼2009-10-04 11:56:47
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HarveyWang

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海外行者

自己问问题，还不说明白了，谁会帮你啊？！
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5楼2009-10-04 12:04:17
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木子米米

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-10-4 12:04:

自己问问题，还不说明白了，谁会帮你啊？！


对不起，因为我还不知道里面有没有生物碱，这只是一个前提实验。做TLC得纯度比较高的时候才行。要是知道里面含什么生物碱，我还用沉淀剂干嘛？
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6楼2009-10-04 15:45:17
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tfang

木虫之王 (文坛精英)

木虫008之大懒虫
用甲醇洗，可以把一些糖洗出来的
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同志们：别炒股，风险太大了，还是做豆腐最安全！做硬了是豆腐干，做稀了是豆腐脑，做薄了是豆腐皮，做没了是豆浆，放臭了是臭豆腐！稳赚不亏呀！何乐而不为！
7楼2009-10-04 15:52:53
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HarveyWang

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amisking(金币+6,VIP+0): 10-4 20:42
引用回帖:
Originally posted by 木子米米 at 2009-10-4 15:45:

对不起，因为我还不知道里面有没有生物碱，这只是一个前提实验。做TLC得纯度比较高的时候才行。要是知道里面含什么生物碱，我还用沉淀剂干嘛？

哈哈哈啊哈哈啊哈哈哈哈哈哈。。。。
原来是判断发酵液中有没有生物碱类物质啊？！

看看你这个圈子绕的。。。

建议你去打液质联用，
HPLC条件自己查，这要根据你自己估计的有什么生物碱具体去查资料，
应该很多这类的文献啊，
所有可能的出峰都去做，
设一个生物碱类的分子量范围
（你总归要知道可能会有哪些生物碱类吧，它们的分子量都是可以查到的），
然后根据可能的分子量做初步判断。

这比你去发酵液的多糖来的更容易，更精确和直接。
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8楼2009-10-04 16:52:12
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svidy

金虫 (正式写手)
★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 10-4 20:42
木子米米(金币+1,VIP+0): 10-5 07:58
使发酵液里面醇含量到达80%以上就可以了
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9楼2009-10-04 20:35:08
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