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pshuai

银虫 (著名写手)

[求助] 求助--抑制蛋白水解 已有3人参与

请问各位大神,我这有一个蛋白是四聚体结构,在缓冲溶液中会发生水解,用过蛋白酶抑制剂效果不太好,请问需要添加什么物质才能抑制水解发生??
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
pshuai: 金币+5, ★有帮助, 谢谢 2023-06-14 14:27:05
不确定蛋白酶就加蛋白酶抑制剂混合制剂(cocktail)和EDTA,确定是哪个酶就加特定的抑制剂。加了cocktail和EDTA还是不管用,而且也不知道是哪种蛋白酶导致的水解,就只能保证低温尽快完成分离蛋白或完成实验。
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2023-06-14 13:18:51
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你先判断下是水解了,还是解离平衡成单体了,如果是解离平衡成单体了,可能需要给蛋白做些特殊的结构设计
3楼2023-08-12 17:37:23
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p53jun

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

生物体里面是有白蛋白等,部分帮助其他蛋白保持溶液中稳定。你可以用带有纯化标签的其他便宜蛋白质试试。或者加氨基酸?利用水解平衡常数?
4楼2024-05-29 14:52:57
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