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09021122

木虫 (正式写手)

[交流] 克隆注意几点

说说我的实验经验:
1:在做克隆实验时感受态细胞不能反复冻融,最好再感受态细胞制备好后分装成小分,在做实验时拿出一份即可。
2:配连接体系时不一定要按照书上的说的十微升的体系,只要结果很好,用少的体系也无妨,我用的就是2.5微升的体系,效果非常好,这样可以省很多费用。
3:在涂平板时加的X-gal和IPTG一定要是现配的,不然的话可能会长不出菌,如果加Amp的话。
4:在涂平板时最好设置一个梯度,即加菌液的体积要有一个梯度,而且最好留一部分菌液保存起来,以备后用。
等等吧,以上只是我在实验时遇到的一些问题和看法,希望对大家有用处!
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