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five56

新虫 (小有名气)

[交流] 载体构建成功后碱基突变 已有2人参与

想问一下友友们,载体构建返回测序结果cds区碱基突变,并且对应氨基酸改变,这可能是什么原因呀,做了5个,4个有这样的情况,且突变碱基不同,这5个不是同时做的
之前没出现过这样的情况

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five56

新虫 (小有名气)

送红花一朵
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2楼: Originally posted by 打工人小欢 at 2023-06-08 14:51:21
不知道你克隆的cds有多长,你这种情况首先换用高保真酶,另外PCR的时候减少循环数,送测序的时候一次性多送几个待测菌。

好的 谢谢

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3楼2023-06-13 14:42:53
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打工人小欢

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不知道你克隆的cds有多长,你这种情况首先换用高保真酶,另外PCR的时候减少循环数,送测序的时候一次性多送几个待测菌。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2023-06-08 14:51:21
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Giuxgyo

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也遇到这个问题,再到后来重新构直接连不上了,后来楼主怎么解决的啊
4楼2024-01-21 11:24:15
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