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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 想去掉质粒上的3bp，用引物进行环形pcr可以p出来吗
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悠悠悠蓝哒

新虫 (初入文坛)

[求助] 想去掉质粒上的3bp，用引物进行环形pcr可以p出来吗 已有3人参与

比如质粒上有一段序列是AAAAAAAAAACCCTTTTTTTTTTT，我想要的是AAAAAAAAAATTTTTTTTTTT，所以设计一段序列为TTTTTTTTTTAAAAAAAAAA的引物进行PCR，可以P出来去掉CCC的条带吗？

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2023-05-13 09:22:36
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金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以，要是质粒比较小，可以用环形PCR，问题是你需要的是质粒，做完了PCR还是要环化，最简单的是在质粒上找俩酶切位点，设计两段引物，通过同源重组一次性搞定即可
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3楼2023-05-15 18:51:07
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shuaibia6

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
理论上可以，建议3’端重合15个bp以上
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2楼2023-05-15 11:30:29
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打工人小欢

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

建议你先使用AAAAAAAAAA的引物进行PCR，本轮PCR完成以后，再使用TTTTTTAAAAAAA的引物扩增上轮的PCR产物。
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4楼2023-06-08 17:24:56
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