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随心行0912

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶动力学参数拟合时试验点后半部分逐渐下降

想请教下大家有无遇到过这种情况,随着底物浓度增加,反应速度先逐渐增加,到达峰值时随浓度增加开始下降(如图呜呜呜啊图传不上去,一般来说应该是不变的对吧),我的酶是谷氨酸脱羧酶,对pH的依赖程度很强(偏酸性,且pH适应范围比较窄及酶活较高的范围比较窄),一开始怀疑是由于后期底物浓度高了加的底物母液改变了体系的pH,于是第三次(前面测了两次,第一次出现这种情况后第二次翻倍了母液浓度试图降低体系里底物液占比,但后面还是会下降)直接配好底物液体后把他用酶活体系中酸调成了偏酸性再次反应,但测出来的结果依然后面会下降,请问大家遇到过这种情况吗?都是如何处理的?谢谢大家~(其实测了三次感觉Vmax和Km也算能看出来了感觉,大家怎认为?欢迎讨论!)
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