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质壁分离的实验方法
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实验原理 当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，根据扩散作用原理，水分子会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而原生质层伸缩性较大，从而使二者分开；反之，外界溶液浓度小于细胞液浓度，则细胞通过渗透作用吸水，分离后的质和壁又复原。 实验器材： 紫色洋葱的鳞片叶、刀子、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜；质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液或质量分数为30%的蔗糖溶液、清水。 方法步骤 一 临时装片制作： 选材： (1)选用紫色特别深的洋葱外表皮；说明：Ⅰ：在实验之前，最好将洋葱放在水中浸泡一下，可以使洋葱吸水多一些，而且代谢也比较旺盛，实验效果明显。Ⅱ：将洋葱的外层剥去两层，因为处于最外的可能已经死亡。 (2)取表皮：在洋葱的外表皮上，用刀片划“井”字，用镊子轻轻撕取一小块；关键：最好撕取单层细胞，如果撕的太厚，则会使细胞重叠，严重影响实验效果。 制片： 在载玻片中央滴上一滴清水，然后将取下的洋葱表皮放在水中，平展开来；加上盖玻片。 注意：Ⅰ：洋葱表皮不能卷曲起来；Ⅱ：不能带有气泡；Ⅲ加盖玻片时，要从一侧大约45°角放下，在载玻片和盖玻片之间充满了清水，以便挤出空气。 观察： 约5分钟后，用显微镜观察，可见在蔗糖溶液滴中的细胞原生质体先自细胞角隅处脱离细胞壁，最后整个原生质体脱离细胞壁成圆形，此状即为细胞的质壁分离现象。观察时用放在清水里的洋葱表皮作比较。 质壁复原实验 处理 取下临时装片，在一侧滴入清水，另一侧再用吸水纸重复几次吸引，以确保洋葱表皮细胞完全浸在几乎是清水中； 观察 先在低倍镜找到一个质壁分离现象比较明显的细胞，然后观察，可见和刚才相反的现象，中央液泡渐渐变大，颜色变浅，最后原生质层又和细胞壁紧紧地贴在一起；若质壁分离没有复原，则证明外界溶液浓度过高，导致细胞死亡。三 总结：细胞液浓度小于外界溶液浓度时，细胞通过渗透作用失水，发生质壁分离现象;细胞液浓度大于外界溶液浓度时，细胞通过渗透作用吸水，发生质壁分离复原现象。 作者：毕合生物 公众号：毕合生物 以上内容由毕合生物提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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