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ffplant

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by C12ire1 at 2023-05-12 14:58:25
我也有过怀疑是否是酶切时间过长,同时也怀疑是否产生星号活性,昨晚换了ecroi的buffer,同样也未改善多少,接下来试一下缩短酶切时间吧,那我大概酶切多长时间呢,用的是赛默飞的酶,推荐时间是1-16小时
...

按推荐的最短时间试一下吧,你这种情况只能逐一排除问题,要确定酶切时间的问题、酶的问题和载体的问题,赛默飞的酶应该挺贵的,你可以用比较便宜的限制酶单酶切一下观察线性条带大小是否准确确定是不是载体的问题
11楼2023-05-12 16:54:54
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C12ire1

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by ffplant at 2023-05-12 16:54:54
按推荐的最短时间试一下吧,你这种情况只能逐一排除问题,要确定酶切时间的问题、酶的问题和载体的问题,赛默飞的酶应该挺贵的,你可以用比较便宜的限制酶单酶切一下观察线性条带大小是否准确确定是不是载体的问题...

好的,我先尝试一下

发自小木虫Android客户端
12楼2023-05-12 16:56:32
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KM石头

金虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by C12ire1 at 2023-05-12 14:58:25
我也有过怀疑是否是酶切时间过长,同时也怀疑是否产生星号活性,昨晚换了ecroi的buffer,同样也未改善多少,接下来试一下缩短酶切时间吧,那我大概酶切多长时间呢,用的是赛默飞的酶,推荐时间是1-16小时
...

配多一点,每隔两个小时取一次样,跑胶看一下
13楼2023-05-12 17:24:40
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