【答案】应助回帖

10楼: Originally posted by C12ire1 at 2023-05-12 14:58:25
我也有过怀疑是否是酶切时间过长，同时也怀疑是否产生星号活性，昨晚换了ecroi的buffer，同样也未改善多少，接下来试一下缩短酶切时间吧，那我大概酶切多长时间呢，用的是赛默飞的酶，推荐时间是1-16小时
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11楼: Originally posted by ffplant at 2023-05-12 16:54:54
按推荐的最短时间试一下吧，你这种情况只能逐一排除问题，要确定酶切时间的问题、酶的问题和载体的问题，赛默飞的酶应该挺贵的，你可以用比较便宜的限制酶单酶切一下观察线性条带大小是否准确确定是不是载体的问题...

10楼: Originally posted by C12ire1 at 2023-05-12 14:58:25
我也有过怀疑是否是酶切时间过长，同时也怀疑是否产生星号活性，昨晚换了ecroi的buffer，同样也未改善多少，接下来试一下缩短酶切时间吧，那我大概酶切多长时间呢，用的是赛默飞的酶，推荐时间是1-16小时
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