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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » qPCR中NTC阴性对照有ct值且熔解曲线与正常组重合
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孙韦地

新虫 (初入文坛)

[求助] qPCR中NTC阴性对照有ct值且熔解曲线与正常组重合

以大肠质粒为模板做绝对定量，但是阴性对照NTC中不仅有ct值（比实验组大很多）而且熔解曲线跟实验组重合，这是什么原因呀？如果是引物污染的话NTC的熔解曲线不应该和实验组重合吧
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1楼 2023-05-06 21:12:32
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ffplant

新虫 (小有名气)
ct值很大且熔解曲线和实验组一致，大概率是气溶胶污染，或者你做阴性对照的水有模板污染

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2楼2023-05-08 11:51:11
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孙韦地

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ffplant at 2023-05-08 11:51:11
ct值很大且熔解曲线和实验组一致，大概率是气溶胶污染，或者你做阴性对照的水有模板污染

是的，后来发现就是气溶胶污染
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3楼2023-05-11 17:45:12
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孙韦地

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ffplant at 2023-05-08 11:51:11
ct值很大且熔解曲线和实验组一致，大概率是气溶胶污染，或者你做阴性对照的水有模板污染

后来查资料发现别人也有这种情况，我把样品和阴性对照分开加NTC就没有CT值了，谢谢了
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4楼2023-05-11 17:47:09
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