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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 用crispr技术对酿酒酵母进行改造，为何菌p出现多个条带
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蓝帽子g

新虫 (初入文坛)

[求助] 用crispr技术对酿酒酵母进行改造，为何菌p出现多个条带

各位大佬，我用crispr对酿酒酵母进行基因敲入，我的供体片段是目标基因表达盒两侧加上敲入位点两端同源臂，但目标基因是酿酒酵母基因组上的基因，转化后长出来挺多菌落，但是菌p出来多个条带，请问是什么问题？也做了很多次，求求大佬！
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1楼 2023-04-29 22:50:31
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
抗性筛选吗

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2楼2023-04-30 23:18:31
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蓝帽子g

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2023-04-30 23:18:31
抗性筛选吗

转入的crispr质粒是带有营养标签，可以筛选的，但是敲入的片段中不含任何抗性筛选的标签
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3楼2023-05-01 17:33:40
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
你的标签是leu还是his

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4楼2023-05-02 10:14:14
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蓝帽子g

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biosci at 2023-05-02 10:14:14
你的标签是leu还是his

ura
5楼2023-05-07 22:23:03
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7901117076

新虫 (小有名气)
引物在基因组上不特异

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6楼2023-08-20 10:20:39
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